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临床护理常规及专科护理技术
Clinical Nursing Routine and Specialized Nursing Technology

的葡萄糖磷酸酶的缺乏会导致小鼠肾脏中糖原的积累，从而引发一系列的并发症。
Clar 等Ⅲ人利用 ZFNs 技术得到 G6pc 基因缺失小鼠，成功构建了小鼠肾病模型，
为该病的研究奠定了基础。囊性纤维化（cysticfibrosis，CF）是由囊性纤维化跨

膜传导调节因子（cystic fibrosis transmembrane conductance regulator，CFTR）基
因突变引起的一种常染色体隐性遗传病，临床症状为慢性梗阻性肺部疾病、胰
腺外分泌功能衰竭和男性不育等。近几年，有些学者应用开源式（oligomerized
pool engineering，OPEN）方法，通过锌指核酸酶技术（ZFNs）成功敲除了猪的

CFTR 基因，建立了猪 CF 疾病动物模型。目前锌指核酸酶技术已经成功应用于
很多物种的遗传研究，在大鼠、小鼠、斑马鱼和果蝇等模式动物中实现了基因的
定点突变，且此突变可顺利遗传至 F1 代中，为剖析多种生物过程的分子机制奠
定了基础。虽然 ZFNs 技术已经应用于构建动物模型中，但其设计筛选耗时费力，

而且可能存在脱靶效应，使其未能成为广泛应用的常规技术。
（二）TALENs 技术在人类疾病动物模式中的应用
随着 2010 年 TALENs 技术的兴起，利用其操作方便、特异性强、经济高效、
适用范围广的基因组定点修饰的特点成功构建了许多人类疾病动物模型。Zhang

等利用 TALENs 技术在 H2.35 细胞系中敲除肝癌细胞中常见发生突变的 B-catenin
（Ctnnb1）和 APC，进而通过高压水动力法运送 B-catenin（Ctnnb1），并结合
腺病毒包裹 APCTALENs，在活体小鼠内敲除这两基因，成功构建了小鼠肝癌模
型。Park 等基于 TALEN 技术在 hiPSC 细胞将含有 F8 基因的 140kb 染色体片段
倒置，建立了人源化的小鼠血友病 A 模型。此外，为了能够更好地验证 TALEN

技术可以纠正该疾病致病基因，研究人员再次通过 TALEN 基因编辑工具将其之
前倒置的 140kb 的染色体片段再重新恢复到正常，结果显示经 TALEN 纠正修饰
的疾病细胞可以检测到 F8 基因的 mRNA，而未经 TALEN 介导修饰的细胞未检

测到 F8 基因的 mRNA。该项结果提示，TALEN 基因编辑工具既可以建立疾病模
型，又可以介导疾病的再次纠正。MECP2 基因位于 x 染色体，该位点的突变通
常会造成妊娠中期雄性胎儿死亡，仅有雌性胎儿顺利出生并存活，但会在出生后
6~18 个月开始发病，表现自闭症特点的“Rett 综合征”（Rettsyndrome，RTT，

一种严重影响女性神经系统发育的疾病）。2014 年，研究人员利用 TALEN 技术
对食蟹猴 x 染色体连锁基因 MECP2 基因敲除，这是利用这项技术构建出的首个
非人类灵长类动物模型。研究结果显示，该基因突变的雄性胎儿在怀孕期间流产，

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