Page 157 - 临床护理常规及专科护理技术

第六章 人类疾病动物模型技术发展

HBV 诱发树鼩 HCC 过程中所起作用，1999 年李瑗等通过对血液及肝脏组织进
行 HBV 感染标志和常规病理组织学等检测，动态观察了 HBV 和 AFB1 在树鼩
HCC 形成过程中的作用，发现 HBV 只有与 AFB1 协同作用时才能表现出较强的

致 HCC 能力，之后为了进一步揭示 HBV 和 AFB 在 HCC 中的相互作用，评估
与高危人群有关的化学影响因素，该团队每天给两组树鼩喂食 400g/kgAFP，对
照组每天接受奥替普拉（0.5mmol/kg，口服）5 周，并用放射免疫分析法和高效
液相色谱法（HPLC）每隔 1 周分别测定血清中的黄曲霉毒素 - 白蛋白复合物及

尿中黄曲霉毒素 -N- 鸟嘌呤复合物，发现奥替普拉能明显降低整个暴露期间血清
中的黄曲霉毒素 - 白蛋白复合物及尿中黄曲霉毒素 -N- 鸟嘌呤复合物的总体水平，
说明奥替普拉减少了 AFB 在树鼩中的 HCC 高危风险生物标志物，该结果与在啮
齿类动物和人类中所观察到的类似，初步建立了评估奥替普拉在人类 HBV 感染，

AFB 暴露在树鼩 HCC 中化学预防的理论基础。
20 世纪初期，随着分子技术的迅猛发展，对树鼩 HCC 动物模型的研究也开
始转入分子水平，班克臣等人首先从基因水平研究了 HBV 和 AFB1 双重暴露因
素下树鼩 HCC 模型中癌基因及抑癌基因的变化，发现 ras 癌基因突变蛋白 p21

在 HBV 和 AFB 诱导树鼩 HCC 过程中的表达显著增强；2000 年 ParkUS 等先通
过 RT-PCR 和自动 DNA 测序确定了树鼩野生型 p53 核苷酸序列及氨基酸序列并
与人类 p53 核苷酸序列和氨基酸序列比对，发现其同源性较大鼠、小鼠更高，分
别为 91.7% 和 93.4%，进一步分析发现在 HBV 感染和 AFB1 暴露产生的 HCC 中

具有在第 13 个密码子的第 2 位胞嘧啶与腺嘌呤置换；将脯氨酸变为丝氨酸，在
第 275 个密码子的第一位置处腺嘌呤与胞嘧啶替换；将半胱氨酸改变为精氨酸，
而且在 HBV 感染或未感染的 AFB1 处理的树鼩 HCC 中，p53 突变率较低，尽管
有一个 HCC 在 p53 基因的 DNA 结合域（密码子 275）上显示错义突变，但仍需

要进一步验证 p53 突变体是否获得了功能性。
尽管树鼩 p53 密码子（247-250）的核苷酸序列与人类相同，并且预期具有
与 AFB1 诱导的突变类似的分布，但是在 AFB1 处理组并未出现预测之中的表现，
因此物种差异可能是影响 AFB1 暴露及 HBV 感染的重要因素，其具体机制有待

进一步探究。近年来也有文献报道利用树鼩进行跨种属筛选肝癌关键基因和蛋白
的研究，目前已经通过比对不同种属的动物的癌细胞、癌旁细胞及正常肝组织的
相关基因和蛋白表达，发现了 Smad3、Cdc25a、MCM7 等可能是影响肝癌发生

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