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畜牧兽医技术创新及发展 第三章 动物疾病诊断
Innovation and Development of Animal Husbandry and Veterinary Technology
间接凝集试验、间接血凝试验、SPA 协同凝集试验、乳胶凝集试验、血凝和血凝
抑制试验)、沉淀试验(环状沉淀试验、琼胶扩散沉淀试验和免疫电泳等)、溶
细胞试验(溶菌试验、溶血试验)、补体结合试验以及免疫荧光技术、酶联免疫
吸附试验、免疫酶技术、放射免疫分析等。近年来由于与现代科学技术相结合,
血清学试验在方法上日新月异,发展很快,其应用也越来越广,已成为疫病快速
诊断的重要工具。以猪瘟血清学诊断方法为例,分为以下几种。
1. 间接血凝试验
间接血凝试验是用已知血凝抗原检测未知血清抗体的试验,称为正向间接血
凝试验(IHA)抗原,与其对应的抗体相遇,在一定条件下会形成抗原抗体复合物,
但这种复合物的分子团很小,肉眼看不见。若将抗原吸附(致敏)在经过特殊处
理的红细胞表面,只需少量抗原就能大大提高抗原和抗体的反应灵敏性。这种经
过猪瘟纯化抗原致敏的红细胞与猪瘟抗体相遇,红细胞便出现清晰可见的凝集现
象。间接血凝试验操作简单,易制定,既可检测抗原,也可检测抗体,可以有效
监测猪瘟免疫抗体水平。
2. 酶联免疫吸附试验(ELISA)
猪瘟弱毒单抗纯化酶联抗原和猪瘟强毒单抗纯化酶联抗原,分别供检测经猪
瘟弱毒疫苗免疫后产生的抗体和感染猪瘟强毒后产生的抗体之用。
3. 反转录聚合酶链反应(RT-PCR)
PCR 技术是以待扩增的两条 DNA 为模板,在一对人工合成的寡核苷酸引物
的介导下,通过耐高温 DNA 聚合酶的酶促作用,快速特异地增出特定的 DNA
片段。广泛用于猪瘟病毒感染和猪瘟的诊断。
4. 间接免疫荧光试验
一般是采用发病动物器官的冰冻组织切片直接进行荧光抗体试验,许多国家
和地区已将该法作为法定诊断方法,在中国的应用也较为广泛。此法操作简便、
结果可靠,可在 2h 内完成。检查器官可以是扁桃体、脾、肾等,以扁桃体为最佳。
也可将病料乳剂接种细胞培养物,随后再用荧光抗体检出感染细胞,这样可提高
敏感性。
5. 其他血清学诊断技术
除上述几种常用的血清学诊断方法以外,还有一些其他的诊断技术,其中包
括动物试验、病毒分离、血清中和试验、骨髓细胞学检查法、核酸探针杂交试验
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