Page 29 - 畜牧兽医与现代农业技术研究

第二章 动物防疫检疫

象是小白鼠，注射剂量需要控制为 0.2mL。随后取出 0.5mL 和 0.1mL 的菌液，
分别向鸽子和小白鼠体内注射。发现接种后 3~4h 出现死亡。随后制作图片，采
用已经死亡动物的脏器或心血作为材料，之后再进行镜检。如果疫病为典型的羊
丹毒杆菌能确诊出来。

（三）实验室针对羊瘟的诊断方法
1. 对于监测样品的采集
使用的是濒临死亡或已经死亡以及屠宰死亡的羊的新鲜扁桃体和肾脏，把每
个样品都放入到对应的灭菌容器里。

2. 监测方法选择
选择直接荧光抗体方法进行监测。
3. 对于冰冻切片的制作
切片制作期间选择新鲜的肾脏组织块，和一些比较新鲜的扁桃体，制作过程

可以适当应用冰冻切片机，把冰冻组织片的厚度制成 5~7μm，随后将其放置在清
洁的载玻片上，置于空气中自然干燥，于室温条件下向其中放入纯丙酮，15min
后将其取出，轻轻地漂洗几次，自然干燥后等待染色。
4. 关于染色方法的应用

取出 2~3 滴，应用荧光标记的羊瘟抗体，把它覆盖到固定组织切片上，随后
在有一定湿度的小盒里面进行放置，于 37℃的条件下作用 30min，这样才能让荧
光抗体更好吸收。一定要保证染色期间不会出现染色液干涸问题，完成染色后使
用 PBS 液把切片浸洗 3 次，还要进行 3 次换水，每次都要分种。将切片取出后

放入到室温下，等达到半干状态后使用缓冲甘油封片，立刻实施镜检。
5. 结果判定
荧光显微镜下检查切片，如果被检切片显现肾曲小管或扁桃体隐窝有上皮细
胞胞浆存在，并且呈现出来的状态是明亮的翠绿色荧光。检查时候如果能把细胞

形态清晰发现出来，我们就能认为属于一种阳性反应。如果荧光较为微弱，细胞
形态不清或者没有荧光便可以将反应定性为阴性。
（四）实验室对旋毛虫诊断的方法
1. 采样概述

取肉尸中 20g 处在左右位置的横膈肌角的肉样。放到化验室里面和肉尸编上
相同号码储存器皿进行检查。

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