Page 351 - 新编动物防疫检疫手册

附件 1
马传染性贫血琼脂扩散反应试行操作方法

1 检验用琼脂板的制备

1.1 取高级琼脂糖 1 克或普通琼脂 1.2 克直接放入加有 500mL 蒸馏水的三角

瓶中，配成 2% 的琼脂溶液，在沸水浴中煮沸，全融化后再冷凝，切成 1 ～ 1.5cm3
小块，装入干净砂布袋中，用 10 倍量自来水冲漂两天，每天换水两次，然后改用

无离子水冲漂 1 ～ 2 天，每天换水两次。将冲漂完毕的琼脂小块装入 1000mL 三

角烧瓶中，同时加入 500mL 无离子水再加入相当于配制 1000mL 磷酸缓冲液（PBS

液）或硼酸缓冲液（BBS 液）的各种盐类用量，再加入 1% 硫柳汞溶液 10mL，在
沸水浴中使之全融化并混匀。

若是取优质琼脂 1 克时，可直接放入含有万分之一硫柳汞的 100mL 的 PBS 或

BBS 液中，用热水浴融化混匀。

1.2 融化后以两层纱布夹薄层脱脂棉过滤，除去不溶性杂质。
1.3 将直径 90mm 的平皿放在水平台上，每平皿倒入热融化琼脂液

15 ～ 18mL，厚度约 2.5mm 左右，注意不要产生气泡，冷凝后加盖，把平皿倒置，

防止水分蒸发，放在普通冰箱中可保存两周左右。根据受检血清样品多少亦可采

用大、中、小三种不同规格的玻璃板。10×16cm 的玻璃板加注热琼脂液 40mL；
6×7cm 的加注 11mL；32×7.6cm 的加注 6mL。

琼脂经处理后配成的琼脂液，可装瓶中用胶塞盖好，以防水分蒸发，待使用

琼脂板时，现融化现倒。

1.4 打孔
反应孔现用现打。打孔器为外径 5mm 直径的薄壁型金属打孔器。在坐标纸上

画好七孔型图案。把坐标纸放在带有琼脂板的平皿或玻璃板下面，照图案在固定

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