Page 75 - 生态环境监测技术应用
P. 75

生态环境监测技术应用
             pplication of Ecological Environment Monitoring Technology


            境质量评价时,有必要将之作为重点研究对象。当前对于微生物群落结构的分析
            主要有两种思路,内容如下。
                (1)生化研究方法

                依据试验材料的不同,生化研究方法又可被细分为 3 种。首先是平板技术,
            操作时需要借助平板结构对土样中微生物细胞进行分离、培养操作,然后根据菌
            落形态、数量等,进一步推测微生物群落结构,这种方法速度较快,但对真实状
            况的反映不足,与实际微生物量相比,培养量微乎其微,准确度很难保障,因此

            已经逐渐被淘汰、弃用。其次是废物利用分析法,Biolog 就是其中较具代表性的
            技术类别,可以再现群落代谢特征,操作简便,自动化特征显著,但适用范围相
            对受限,在生长速度较快的微生物群落中表现出较高的适用性。最后是生物标记
            法,主要借助了 PLFA 等物质,该物质对细胞活性反应较为敏感,在活细胞中,

            性质、含量会相对稳定,但在死细胞中,会快速分解、消散。将之应用于土壤微
            生物群落测定,可以较为直观地展现相关信息,也不会受到质粒损失的干扰,与
            GC-MS 技术相结合,效率、准确度更高。
                (2)分子生物学研究方法

                分子生物学研究方向主要从微观视角出发展开测定,核酸杂交技术就是其中
            具有代表性的一员,实践时采用核酸探针开展操作,使其与样本核酸序列发生异
            性互补,并对杂交信号进行荧光标记,该种方式克服了同位素标记操作难度大的
            弊端,灵敏度高且使用简便。其次还有 DNA 成分多态性图谱分析法,DGGE 应

            用相对广泛,主要利用了 DNA 片段解链行为的相关特征,可以在较为理想的状
            况下,促进同等尺寸片段的分离。TGGE 方法则建立在温度梯度变性原理的基础
            上,分析对象为核苷酸片段,操作时需要经过核酸提取、指纹图谱分析等步骤。
            除上述方法外,DNA 长度多态性图谱分析、高通量测序技术也是较为新颖、可

            行的技术手段,在进行土壤环境质量评估时要合理选用。
                2.shannon 指数分析
                本次评估应用 PCR-DGGE 技术,以对照组为基准展开分析,结果表明各样
            本在细菌微生物种群构成上,是存在较大差异的,优势菌群条带差异尤为明显。

            为方便量化分析,引入了 shannon 指数,它可以客观描述群落规模、多样性等,
            土壤中微生物种类越多、分布越均匀,该指数就越大。结果发现,在多数受污染
            区域的微生物测定中,指数是大于对照土壤的,这可能是因为重金属等污染物作



            -62-
   70   71   72   73   74   75   76   77   78   79   80