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畜牧兽医技术创新及发展 第二章 动物疫病监测及防控
Innovation and Development of Animal Husbandry and Veterinary Technology
虽然临床症状诊断和病理学诊断可以对患病动物方便快速地作出初步或疑似
诊断,但在疫病的潜伏期较难准确判断,并且许多高致病性疫病存在许多类似的
症状,如与口蹄疫有类似症状的疫病有水疱性口炎(VS)、猪水疱病(SVD)、
猪水疱疹(SVE)等,不易直接作出临床诊断,可疑病例必须借助实验室检测才
能进行确诊。
(二)实验室诊断方法
1. 病原生物学诊断
病原生物学诊断技术诊断疫病的主要方法是病原微生物的分离鉴定,根据分
离得到的样本的形态或理化性质来进行诊断。例如,病毒分离鉴定是诊断口蹄疫
(FMD)的最可靠的方法,主要应用细胞培养和动物接种来分离病毒。又如从
待检病料样品中分离和培养猪流感病毒(SIV)在检测宿主范围和致病机理的研
究及疫苗生产等方面都很重要。同时,也有许多报道通过病毒分离鉴定了猪流感
病毒的亚型。
2. 血清学诊断
(1)酶联免疫吸附试验
酶联免疫吸附试验(ELISA)的基本原理是将抗原或者抗体吸附于固相载体,
在载体上进行免疫酶反应,通过底物显色后用肉眼或者分光光度计判定结果。作
为一种免疫诊断技术,ELISA 自 20 世纪 70 年代初问世以来发展十分迅速,已被
广泛用于生物学和医学的各个领域,并且随着技术进步,学者们在不断改进传统
ELISA 的同时,还将 ELISA 技术与单克隆抗体(MAb)、PCR、生物素 - 亲和
素(biotin-avidin)系统、Dot-blot 等技术相结合,产生了多种新型 ELISA 技术。
孙元等利用杆状病毒表达的猪瘟病毒(CSFV)重组 E2 蛋白作为包被抗原,辣根
过氧化物酶标记的 E2 蛋白中和性单克隆抗体作为竞争抗体,建立了一种用于检
测 CS-FV 中和抗体的重组 E2 蛋白竞争抑制 ELISA(CI-EUSA)方法。MaLN 等
通过对比超过 100 篇 ELISA 用于 FMD 诊断及抗原分析的文献中 ELISA 的灵敏
度和特异性,发现抗体捕获竞争性 ELISA 有更高的特异性,而 RT-PCRELISA 有
较高的灵敏度。
(2)血凝及血凝抑制试
验血凝(HA)及血凝抑制(HI)试验在新城疫和猪流感等的诊断中有一定
的应用。由于 NDV 病毒粒子囊膜上的血凝素能凝集鸡和多种动物的红细胞,出
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