Page 75 - 畜牧兽医技术创新及发展

第二章 动物疫病监测及防控

物上，然后与待测样本的 DNA 或 RNA 进行杂交，通过检测每个探针分子的杂
交信号强度进而获取样品分子的数量和序列信息。该法可以同时完成对样品中多
个序列的检测和分析。由于其具有的高通量、高集成、微量化、自动化、污染少、
可多基因多标本平行检测等特点而被广泛应用于病原分型和疾病诊断。杨忠苹等
开发了可同时区分 H5、H7、H9 亚型血凝素及 N1、N2 神经氨酸酶亚型的 DNA

芯片诊断技术，该方法可以快速诊断禽流感病毒的部分亚型。叶芬等建立猪繁殖
与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪瘟病毒（CSFV）和猪圆环病毒 2 型（PC2）
基因芯片快速检测体系。该基因芯片检测方法和 PCR/I-PCR 检验检测方法符合

率高达 92%，表明该检测技术能够用于临床病料的检测及快速诊断 PRRSV、
CSFV 和 PCV-2 感染。杨若松等建立猪瘟病毒（CSFV）、高致病性猪蓝耳病病
毒（PRRSV）、猪圆环病毒 2 型（PCV-2）及猪细小病毒（PPV）的基因芯片检
测方法，对临床 150 份样品的检测结果显示，该方法具有良好的特异性、敏感性

和重复性。王建东等完成了口蹄疫病毒基因芯片的制备。这些研究为基因芯片在
高致病性动物疫病的应用奠定了基础。
4. 其他诊断方法
（1）逆转录—环介导等温扩增技术

逆转录—环介导等温扩增技术（RT-LAMP）是近几年才使用的一种新方法。
LAMP 是 2000 年开发的一种新颖的恒温核酸扩增方法，其特点是针对靶基因的
6 个区域设计 4 种特异引物，利用一种链置换 DNA 聚合酶在等温条件（63℃左右）
保温 30~60min，即可完成核酸扩增反应。相较于传统 PCR，其具有以下优点，

扩增效率高，特异性强，灵敏度高，成本低，大幅缩短反应时间。秦智锋等建立
了 FMDVRT-LAMP 的检测方法，作者设计了 6 条针对 FM2DV3D 基因的 8 个位
点的特异性引物，从 RNA 的提取到检测仅需要 75min。其优点是程序简单、灵
敏度和特异性高，适合现场检测，缺点是 FMDV RNA 抽提过程要在特定实验室

进行。YinSH 等建立了 CSFVRT-LAMP 的检测方法，该 RT-LAMP 检测方法具有
比 RT-PCR 更高的灵敏性，且与其他相关猪病毒没有交叉反应出现。
（2）生物传感器
生物传感器是指由一种生物敏感部件和转换器紧密结合，对特定种类化学物

质或生物活性物质具有选择性和可逆响应的分析装置。其中，DNA 传感器是目
前生物传感器中报道最多的一种，用于临床疫病诊断是 DNA 传感器的最大优势，

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