Page 73 - 畜牧兽医技术创新及发展
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第二章  动物疫病监测及防控



              现所谓红细胞凝集现象(HA),而 NDV 作为抗原进入鸡体后产生的抗血凝素
              抗体又能抑制此凝集现象的发生(HI),所以 HA 和 HI 试验可以应用于对 NDV
              进行定性和定量检测。而猪流感病毒(SIV)颗粒表面的 HA 蛋白具有识别并吸
              附红细胞表面受体的结构。同时,HA 蛋白的抗体与该蛋白受体的特异性结合能

              够抑制 HA 蛋白与红细胞受体的结合,故而在猪流感的诊断中血凝试验也是常用
              的方法之一。
                  (3)免疫过氧化酶单层细胞实验
                  免疫过氧化酶单层细胞试验(IPMA)可用于诊断高致病性猪蓝耳病和猪流

              感等疫病。目前欧洲国家广泛应用 IPMA 诊断高致病性猪蓝耳病,其敏感性和特
              异性都比较好,可用于 PRRSV 的病毒鉴定及血清抗体检测。该技术也可用于检
              测猪血清中的 SIV 抗体,其特点是特异性强,可检出感染 3d 后的抗体效价。谭
              斌等建立了一种检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)血清抗体的免疫过氧

              化物酶单层细胞试验(IPMA),并组装成 PRRSV-IPMA 抗体检测试剂盒,该试
              剂盒检测 PRRSV 抗体具有较高的特异性和敏感性。常用的中和试验有两种方法,
              即固定血清—稀释病毒法(病毒中和试验)和固定病毒—稀释血清法(血清中和
              试验),在猪流感、高致病性猪蓝耳病和口蹄疫等的诊断中都有一定的应用。血

              清中和试验(SN)是较敏感、特异的血清学方法,但只有抗体与病毒上的表面
              抗原相对应,特别是与吸附到宿主细胞上的病毒表面抗原相对应时才能取得确切
              的试验结果。SN 在研究应用中较广泛,但其存在操作复杂、时间较长(1 周左右)
              等缺点,故较少用于临床进行疾病早期诊断。而病毒中和试验(VN)是世界动

              物卫生组织(0IE)推荐的检测口蹄疫病毒抗体的标准方法。VN 的优点是既可以
              鉴定抗原,又可以对血清抗体进行定量测定,缺点是需要培养单层细胞或饲养实
              验动物。
                  (4)免疫荧光技术

                  免疫荧光技术又称荧光抗体技术,其原理是将不影响抗原抗体活性的荧光
              色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微
              镜下呈现出一种特异性荧光。免疫荧光技术又可分为直接法和间接法,其在新城
              疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病、猪流感等的诊断中都有一定的应用。王元利用

              PRRSV 单克隆抗体 IDI2 作为一抗,建立了在冰冻切片中快速检测 PRRSV 抗原
              的免疫荧光方法,该方法可用于 PRRSV 感染的实验室快速诊断。免疫荧光技术


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