Page 321 - 新编动物防疫检疫手册

4.2 稀释待检血清
取 1 号待检血清 50μL 加入第 1 排第 1 孔，并将塑咀插入孔底，右手拇指轻

压弹簧 1-2 次混匀（避免产生过多的气泡），从该孔取出 50μL 移入第 2 孔，混

匀后取出 50μL 移入第 3 孔……直至第 9 孔混匀后取出 50μL 丢弃。此时第 1 排
1-9 孔待检血清的稀释度（稀释倍数）依次为：1：2 ⑴、1：4 ⑵、1：8 ⑶、1：

16 ⑷、1：32 ⑸、1：64 ⑹、1：128 ⑺、1：256 ⑻、1：512 ⑼。

取 2 号待检血清加入第 2 排；取 3 号待检血清加入第 3 排……均按上法稀释，

注意！每取一份血清时，必须更换塑咀一个。

4.3 稀释阴性对照血清
在血凝板的第 7 排第 1 孔加阴性血清 50μL，对倍稀释至第 4 孔，混匀后从

该孔取出 50μL 丢弃。此时阴性血清的稀释倍数依次为 1：2 ⑴、1：4 ⑵、1：

8 ⑶、1：16 ⑷。第 6-7 孔为稀释液对照。
4.4 稀释阳性对照血清

在血凝板的第 8 排第 1 孔加阳性血清 50μL，对倍数稀释至第 12 孔，混匀后

从该孔取出 50μL 丢弃。此时阳性血清的稀释倍数依次为 1：2-1：4096。

4.5 加血凝抗原

被检血清各孔、阴性对照血清各孔、阳性对照血清各孔、稀释液对照孔均各
加 O 型血凝抗原（充分摇匀，瓶底应无血球沉淀）25μL。

4.6 振荡混匀

将血凝板置于微量振荡器上 1-2 分钟，如无振荡器，用手轻拍混匀亦可，然
后将血凝板放在白纸上观察各孔红血球是否混匀，不出现血球沉淀为合格。盖上

玻板，室温下或 37℃下静置 1.5-2 小时判定结果，也可延至翌日判定。

4.7 判定标准

移去玻板，将血凝板放在白纸上，先观察阴性对照血清1：16孔，稀释液对照孔，

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