Page 317 - 新编动物防疫检疫手册

附件二
反向间接血凝试验（RIHA）

1 材料准备

1.1 96 孔微型聚乙烯血凝滴定板（110 度），微量振荡器或微型混合器，0.025

mL、0.05mL 稀释用滴管、乳胶吸头或 25μL、50μL 移液加样器。
1.2 pH7.6、0.05mol/L 磷 酸 缓 冲 液（pH7.6、0.05mol/L PB），pH7.6、50%

丙三醇磷酸缓冲液（GPB），pH7.2、0.11mol/L 磷酸缓冲液（pH7.2、0.11mol/L

PB），配制方法见中华人民共和国国家标准（GB/T 19200-2003）《猪水泡病诊断

技术》附录 A（规范性附录）。
1.3 稀释液 I、稀释液 II，配制方法见中华人民共和国国家标准（GB/T 19200-

2003）《猪水泡病诊断技术》附录 B（规范性附录）。

1.4 标准抗原、阳性血清，由指定单位提供，按说明书使用和保存。

1.5 敏化红细胞诊断液：由指定单位提供，效价滴定见中华人民共和国国家标
准（GB/T 19200-2003）《猪水泡病诊断技术》附录 C（规范性附录）。

1.6 被检材料处理方法见中华人民共和国国家标准（GB/T 19200-2003）《猪

水泡病诊断技术》附录 E（规范性附录）。

2 操作方法
2.1 使用标准抗原进行口蹄疫 A、O、C、Asia-I 型及与猪水泡病鉴别诊断。

2.1.1 被检样品的稀释：把 8 只试管排列于试管架上，自第 1 管开始由左至右

用稀释液 I 作二倍连续稀释（即 1：6、1：12、1：24……1：768），每管容积 0.5

mL。
2.1.2 按下述滴加被检样品和对照：

2.1.2.1 在血凝滴定板上的第一至五排，每排的第 8 孔滴加第 8 管稀释被检样

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