Page 392 - 新编动物防疫检疫手册
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样品集菌方法
痰液或乳汁等样品,由于含菌量较少,如直接涂片镜检往往是阴性结果。此
外,在培养或作动物试验时,常因污染杂菌生长较快,使病原结核分枝杆菌被抑制。
下列几种消化浓缩方法可使检验标本中蛋白质溶解、杀灭污染杂菌,而结核分枝
杆菌因有蜡质外膜而不死亡,并得到浓缩。
1 硫酸消化法
用 4 - 6%硫酸溶液将痰、尿、粪或病灶组织等按 1:5 之比例加入混合,然
后置 37℃作用 1 - 2 小时,经 3000 - 4000rpm 离心 30 分钟,弃上清,取沉淀物
涂片镜检、培养和接种动物。也可用硫酸消化浓缩后,在沉淀物中加入 3%氢氧
化钠中和,然后抹片镜检、培养和接种动物。
2 氢氧化钠消化法
取氢氧化钠 35 - 40g,钾明矾 2g,溴麝香草酚兰 20mg(预先用 60%酒精配
制成 0.4%浓度,应用时按比例加入),蒸馏水 1000mL 混合,即为氢氧化钠消化液。
将被检的痰、尿、粪便或病灶组织按 1:5 的比例加入氢氧化钠消化液中,混
匀后,37℃作用 2 - 3 小时,然后无菌滴加 5 - 10%盐酸溶液进行中和,使标本
的 pH 调到 6.8 左右(此时显淡黄绿色),以 3000 - 4000rpm 离心 15 - 20 分钟,
弃上清,取沉淀物涂片镜检、培养和接种动物。
在病料中加入等量的 4%氢氧化钠溶液,充分振摇 5 - 10 分钟,然后用
3000rpm 离心 15 - 20 分钟,弃上清,加 1 滴酚红指示剂于沉淀物中,用 2N 盐酸
中和至淡红色,然后取沉淀物涂片镜检、培养和接种动物。
在痰液或小脓块中加入等量的 1%氢氧化钠溶液,充分振摇 15 分钟,然后用
3000rpm 离心 30 分钟,取沉淀物涂片镜检、培养和接种动物。
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