Page 48 - 临床医学检验理论与技术分析
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第二章 临床微生物与寄生虫检验
状排列),高度怀疑为肺炎链球菌。随后,进一步通过生化反应(如胆汁溶菌试
验阳性、Optochin 敏感试验阳性)和血清学鉴定(如肺炎链球菌荚膜肿胀试验阳
性),最终确认为肺炎链球菌感染。在败血症患者诊断中,血液标本的采集需严
格遵循无菌操作,在患者寒战、高热时采集血液,接种于血培养瓶中,进行需氧
和厌氧培养。若培养出金黄色、圆形、凸起、周围有透明溶血环的菌落,经鉴定
为金黄色葡萄球菌,即可明确诊断为金黄色葡萄球菌败血症。
核酸检测技术凭借其快速、敏感、特异的显著优势,在细菌感染诊断领域迅
速崛起并广泛应用。聚合酶链反应(PCR)技术是核酸检测的核心技术之一,其
原理是利用引物特异性结合细菌的特定核酸片段,在体外通过高温变性、低温退
火、适温延伸的循环过程,使目标核酸片段大量扩增。以结核分枝杆菌的核酸检
测为例,采集患者的痰液、肺泡灌洗液等标本,提取其中的核酸,设计针对结核
分枝杆菌特异性基因(如 IS6110 基因)的引物,进行 PCR 扩增。扩增产物通过
琼脂糖凝胶电泳检测,若出现与预期大小相符的特异性条带,即可判断标本中存
在结核分枝杆菌核酸,对于结核病的早期诊断具有重大意义,能够在细菌数量较
少、传统培养方法尚未培养出细菌时,及时做出诊断,为患者的早期治疗争取宝
贵时间。荧光定量 PCR 技术在此基础上更进一步,其在 PCR 反应体系中加入荧
光基团,随着 PCR 扩增的进行,荧光信号强度与扩增产物数量呈正相关。通过
实时监测荧光信号强度,利用特定软件分析,不仅能够定性判断细菌核酸的存在,
还能准确地对细菌核酸进行定量分析。在治疗过程中,通过动态监测细菌核酸含
量的变化,可有效评估治疗效果,如在治疗结核病时,若荧光定量 PCR 检测到
结核分枝杆菌核酸含量逐渐降低,说明治疗方案有效,细菌得到抑制;反之,若
核酸含量持续升高或无明显变化,则需调整治疗方案。
抗体检测在细菌感染诊断中同样占据重要地位。当机体感染细菌后,免疫系
统会启动免疫应答,产生相应的抗体。通过检测血清中的特异性抗体,如 IgM、
IgG 等,可辅助诊断细菌感染。一般在感染初期,机体首先产生 IgM 抗体,其
出现时间较早,但持续时间相对较短,通常在感染后 1~2 周达到高峰,随后逐
渐下降。IgG 抗体产生相对较晚,但持续时间长,在感染后数周甚至数月内仍可
检测到。以伤寒患者为例,发病后 1 周左右,血清中即可检测到伤寒杆菌的特异
性抗体,肥达试验就是基于这一原理进行诊断。肥达试验通过检测患者血清中针
对伤寒杆菌 O 抗原和 H 抗原的抗体效价,来辅助诊断伤寒感染。若 O 抗体效价
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