Page 51 - 临床医学检验理论与技术分析

Clinical Medical Laboratory Theory and Technical Analysis
临床医学检验理论与技术分析

据药敏结果、感染严重程度、患者个体情况等综合判断，制定出最适合患者的抗
菌治疗方案。

第二节 常见病毒感染的检验

一、病毒的检验方法

病毒培养是一种经典的检验方法，包括细胞培养、鸡胚培养和动物接种等。
细胞培养是最常用的方法，根据病毒对细胞的亲嗜性，选择合适的细胞系，如人
胚肾细胞、猴肾细胞等，将待检标本接种到细胞培养瓶中，观察细胞病变效应
（CPE）。不同病毒引起的 CPE 各具特征，如肠道病毒可使细胞变圆、聚集、脱落；

疱疹病毒可导致细胞融合形成多核巨细胞等。鸡胚培养常用于流感病毒等的分离
培养，将病毒接种到鸡胚的特定部位，如尿囊腔、羊膜腔等，培养后收获病毒并
进行鉴定。动物接种则主要用于一些对细胞培养不敏感的病毒，选择敏感动物，
如小鼠、豚鼠等，通过特定途径接种病毒，观察动物的发病情况及病理变化。但

病毒培养操作复杂、耗时较长，且对实验条件要求较高。
免疫荧光技术利用抗原抗体特异性结合的原理，将荧光素标记的抗体与病毒
抗原结合，在荧光显微镜下观察，若存在特异性荧光，则表明有病毒抗原存在。
直接免疫荧光法可直接检测标本中的病毒抗原，快速且特异性高；间接免疫荧光

法则先让标本中的病毒抗原与未标记的特异性抗体结合，再加入荧光素标记的二
抗，通过检测二抗的荧光来间接检测病毒抗原，灵敏度相对较高。免疫荧光技术
可用于多种病毒的快速检测，如呼吸道合胞病毒、腺病毒等。
PCR 技术是目前应用广泛的病毒核酸检测技术，其原理是通过设计特异性

引物，在体外扩增病毒的核酸片段。以流感病毒为例，提取标本中的核酸，加入
针对流感病毒特定基因区域的引物、DNA 聚合酶、dNTP 等成分，经过高温变性、
低温退火、适温延伸等循环过程，使病毒核酸大量扩增。扩增产物可通过琼脂糖
凝胶电泳检测，若出现与预期大小相符的条带，则提示标本中存在流感病毒核酸。

实时荧光定量 PCR 技术在此基础上进一步发展，可实时监测 PCR 扩增过程中的
荧光信号，不仅能定性判断病毒存在，还能定量分析病毒核酸含量，在病毒感染
的早期诊断、病情监测及治疗效果评估等方面具有重要价值。

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