Page 269 - 新编动物防疫检疫手册
P. 269
附 录 A
相关试剂的配制
A.1 变性液
4M 异硫氰酸胍
25mM 柠檬酸钠 .2H2O
0.5%(m/V) 十二烷基肌酸钠
0.1M β- 巯基乙醇
具体配制:将 250g 异硫氰酸胍、0.75M( PH7.0)柠檬酸钠 17.6ml 和 26.4ml
10%(m/V)十二烷基肌酸钠溶于293ml水中。65℃条件下搅拌、混匀,直至完全溶解。
室温条件下保存,每次临用前按每 50ml 变性液加 14.4 mol/L 的 β- 巯基乙醇 0.36ml
的剂量加入。变性液可在室温下避光保存数月。
A.2 2mol/L 醋酸钠溶液(pH4.0)
乙酸钠 16.4 g
冰乙酸 调 pH 至 4.0
灭菌双蒸水 加至 100 mL
A.3 氯仿 / 异戊醇混合液
氯仿 49 mL
异戊醇 1 mL
A.4 1.0% 琼脂糖凝胶的配制
琼脂糖 1.0 g
0.5×TAE 电泳缓冲液 加至 100 mL
微波炉中完全融化,待冷至 50℃ -60℃时,加溴化乙锭(EB)溶液 5µL,摇
匀,倒入电泳板上,凝固后取下梳子,备用。
259
259

