Page 265 - 新编动物防疫检疫手册

型鉴定。
1 试剂 / 引物

1.1 变性液：见附录 A.1

1.2 2M 醋酸钠溶液（pH4.0）：见附录 A.2
1.3 水饱和酚（pH 4.0）

1.4 氯仿 / 异戊醇混合液：见附录 A.3

1.5 M-MLV 反转录酶（200u/μL）

1.6 RNA 酶抑制剂（40u/μL）

1.7 Taq DNA 聚合酶（5u/μL）
1.8 1.0% 琼脂糖凝胶：见附录 A.4

1.9 50×TAE 缓冲液：见附录 A.5

1.10 溴化乙锭（10μg/μL）：见附录 A.6
1.11 加样缓冲液：见附录 A.7

1.12 焦碳酸二乙酯（DEPC）处理的灭菌双蒸水：见附录 A.8

1.13 5× 反转录反应缓冲液（附录 A.9）

1.14 2.5mmol dNTPs（附录 A.10）

1.15 10×PCR Buffer（附录 A.11）
1.16 DNA 分子量标准

1.17 引物：见附录 B

2 操作程序
2.1 样品的采集和处理：按照 GB/T 18936 中提供方法进行。

2.2 RNA 的提取

2.2.1 设立阳性、阴性样品对照。

2.2.2 异硫氰酸胍一步法

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