Page 312 - 新编动物防疫检疫手册
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为了确保检测结果准确可靠，必须最优化组合该 ELISA，即试验所涉及的各
种试剂，包括包被抗体、检测抗体、酶结合物、阳性对照抗原都要预先测定，计
算出它们的最适稀释度，既保证试验结果在设定的最佳数据范围内，又不浪费试剂。
使用诊断试剂盒时，可按说明书指定用量和用法。如试验结果不理想，重新滴定
各种试剂后再检测。
3.2 包被固相
3.2.1 FMDV 各血清型及 SVDV 兔抗血清分别以包被缓冲液稀释至工作浓度，
然后按图 3-1< Ⅰ > 所示布局加入微量板各行。每孔 50μL。加盖后 37℃振荡
2h。或室温（20 ～ 25℃）振荡 30min，然后置湿盒中 4℃过夜（可以保存 1 周左右）。
3.2.2 一般情况下，牛病料鉴定“O”和“A”两个型，某些地区的病料要加上
“亚洲 -I”型；猪病料要加上 SVDV。
图 3-1：定型 ELISA 微量板包被血清布局 < Ⅰ > 、对照和被检样品布局 < Ⅱ >
< Ⅰ > < Ⅱ >1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
A FMDV“O” C++ C+ C- S1 S3 S5
C++ C+ C- 1 3 5
B “A” C++ C+ C- S1 S3 S5
C++ C+ C- 1 3 5
C “Asia-I” C++ C+ C- S1 S3 S5
C++ C+ C- 1 3 5
D SVDV C++ C+ C- S1 S3 S5
C++ C+ C- 1 3 5
E FMDV“O” C++ C+ C- S2 S4 S6
C++ C+ C- 2 4 6
F “A” C++ C+ C- S2 S4 S6
C++ C+ C- 2 4 6
G “Asia-I” C++ C+ C- S2 S4 S6
C++ C+ C- 2 4 6
H SVDV C++ C+ C- S2 S4 S6
C++ C+ C- 2 4 6
试验开始，依据当天检测样品的数量包被，或取出包被好的板子；如用可拆
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