Page 50 - 畜牧兽医疫病防控与技术分析

Animal Husbandry and Veterinary Disease Prevention and Control and Technical Analysis
畜牧兽医疫病防控与技术分析

与 PrioCHECK 商业化的口蹄疫病毒 NSP 检测结果进行比较，结果发现两种分
析方法具有高度一致性，表明研发方案可应用于口蹄疫诊断，可大大节约检测
成本。

此外，另有研究将口蹄疫病毒 0 型（INDR2/1975）、A 型（IND40/2000）
和 Asial 型（IND63/1972）疫苗株灭活全病毒作为抗原免疫骆驼，制备口蹄疫
病毒特异性 Nb。通过构建抗口蹄疫病毒的 VHH 片段，使其在细菌中成功大
量表达，经筛选浓缩后发现，在 ELISA 检测中 VHH 的表位鉴定可以充分捕
捉抗体，代替传统兔血清成为包被抗体，成功应用于液相阻断 ELISA（liquid-

phaseblockingELISA，LPB-ELISA），并且证实建立的 LPB-ELISA 与标准 LPB-
ELISA 相似性极高，而重组 VHH 的生产也非常有助于减少样品检测成本。
还有研究利用双抗夹心法（double antibodysandwich，DAS）分离获得具有

广谱识别能力的特异性 Nb。该抗体可以定量口蹄疫疫苗中的完整衣壳蛋白，是
监测疫苗生产、配制和储存过程中完整衣壳数量和稳定性的极佳工具。2017 年
HarmsenB61 等在美洲驼的免疫文库中，利用噬菌体筛选技术分离到针对口蹄疫
病毒 SAT2 和 Asial 型毒株的特异性 Nb。这些特异性结合 146S 颗粒的 Nb 不会与

其他口蹄疫病毒血清型毒株结合，故利用这一特点构建了新型 ELISA。试验表明，
这些特异性 Nb 可以用作口蹄疫疫苗质量的控制与研发。
根据前人的试验积累，王迪即使用口蹄疫病毒灭活苗免疫双峰驼，构建亲和
力较高的 Nb 免疫文库，筛选得到两株 Nb，并证明这两株 Nb 特异性较好，亲和

力较高。之后他们使用量子点——一种半导体纳米微晶，对单域抗体进行偶联，
发现间接免疫荧光方法可检测到 BHK-21 细胞内的口蹄疫病毒，这有利于检测细
胞与病毒间的关系，为探索 Nb 在口蹄疫检测诊断中的应用提供了新型思路。生物
传感器即通过分子识别元件（生物活性物质）去结合被测目标，从而产生某种物

理或化学变化，将此变化转换为可以被检测到的信号进行分析。Nb 因具有高度特
异性被广泛用作生物传感器。Trilling 等利用识别口蹄疫病毒的 Nb 蛋白制作生物
传感器，采用点击化学方法，将暴露环辛炔的表面等离子体共振（SPR）芯片与具
有叠氮化物的 VHH 结构域反应，结果发现生物传感器的灵敏度提高了 800 倍，表

明这项技术可能有助于加强对口蹄疫的控制和早期诊断。总的来说，随着科技的
进步，抗体已被证明是诊断方法开发的核心。尽管单克隆抗体在诊断中发挥着重

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