Page 47 - 畜牧兽医疫病防控与技术分析

第二章 口蹄疫防治技术

通过肉眼观察颜色变化进行定性分析，在实验室可用该方法替代 PCR 方法做初
步检测。袁彩虹根据 O、A 和 Asia Ⅰ型 3 种血清型口蹄疫病毒全基因组序列建
立了一种口蹄疫病毒通用型 RT-LAMP 快速检测方法。李健等以口蹄疫病毒多聚

蛋白基因建立了口蹄疫病毒的 RT-LAMP。与 PCR 方法相比该方法更快速，整个
扩增过程大约在 1h 内完成，可直接用肉眼观察结果。该检测体系具有极高的特
异性，与其他类似病毒如猪细小病毒、猪水泡病病毒、猪瘟病毒等无交叉反应，
比普通 PCR 和荧光 PCR 的灵敏性高。谢佳芮等根据口蹄疫病毒 O 型、A 型和

Asia Ⅰ型的 3D 基因序列，设计 17 套环介导等温扩增引物，建立了免开盖可视
化判定检测结果的口蹄疫病毒群特异性 RT-LAMP 技术。免开盖是指避免空气中
气溶胶的污染影响肉眼观察到的结果。
（5）基因芯片技术

基因芯片又称 DNA 微阵列，结合了基因探针和杂交测序技术，通过检测芯
片上的杂交信号强度及分布来进行分析，具有高通量、高集成、微型化和自动化
的特点。作为较新的检测技术，近年来基因芯片被广泛应用与优化，更高效、更
稳定。魏春霞等根据已知的 7 种牛易感病原核酸序列，利用多重 PCR 方法，通

过肉眼观察芯片显色程度后，对芯片技术进行优化，建立了具有高通量、高灵敏度、
高特异性等特点的基因芯片检测方法。该方法可在3h内同时检测牛7种病原（Bru、
MTB、Anthrax、口蹄疫病毒、BVDV、BPIV3 和 IBRV）间无交叉反应，所有芯
片可重复使用，且芯片在 2~8℃条件下能保存半年以上，可满足一般实验室的样

品检测及流行病学监查，同时重复使用也可降低成本。刘志鹏等建立了可鉴定和
区分口蹄疫病毒 O、A 和 Asia Ⅰ型 3 种血清型的分型芯片，灵敏度比常规 PCR
高 10~100 倍，特异性也较高，芯片可重复使用，保存 3 个月以上。

二、纳米抗体技术的应用

纳米抗体，一种存在于驼科动物体内仅含有重链可变区的特异性抗体。这些
特异性抗体可以通过自身单个结构域进行抗原识别，最初被命名为 VHH（variable
domain of the heavy chain of heavy-chain antibody），而后根据其相对分子质量极

小的特点被命名为纳米抗体（nanobody，Nb）。Nb 可与酶、底物、放射性物质
和其他生物活性物质连接形成融合的 Nb 以表达特定的功能效应。相比传统单克
隆抗体（monoclonal antibody，mAb）Nb 结合抗原的能力优于 mAb。Nb 抗原结

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