Page 66 - 畜牧兽医疫病防控与技术分析
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Animal Husbandry and Veterinary Disease Prevention and Control and Technical Analysis
畜牧兽医疫病防控与技术分析
通过抗原抗体的结合复合物来检测血清中的 IgG 类抗体。虎红平板凝集方法的优
点在于其灵敏度高、试验成本低、反应时间快并对试验仪器要求较低,缺点是特
异性差,需要靠肉眼判定结果造成主观因素的偏差较大,容易造成结果误判,环
境温度或缓冲液 pH 值异常会严重影响结果的准确性。
2. 试管凝集试验(Standard Tube Agglutination Test,MAT)
试管凝集试验是国标 GB/T 18646-2018 中规定的布病血清学确诊的检测方
法,适用于各种家畜布鲁氏菌病的检测,通过抗原抗体的凝集反应可以检测出人、
畜血清中 IgG 和 IgM 两种抗体。国标中试管凝集试验主要分常量法和微量法,
微量法多用于布病大规模的检测,该方法的优点是特异性高,常量法与微量法符
合率高,且能定量地测定抗体的水平;缺点是试验时间长、操作复杂、不适合现
场检测和基层采用,且无法区别布鲁氏菌和其他的革兰氏阴性菌。
3. 酶联免疫吸附试验(Indirect Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)
目前常用于布病检测的 ELISA 方法有间接以及竞争两种。i ELISA(Indirect-
Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)具有良好的敏感性,检出率可达
95% 以上,标记的抗体较少,成本更低,但是其特异性较低。C ELISA(Competitive
EnzymeLinked Immunosorbent Assay,c ELISA)为竞争ELISA,具有较好的敏感性,
但是整体敏感性和特异性稍低,且在特异性上差异较大。ELISA 检测布病的敏感
性较高,通常使用酶标仪进行读数来判定试验结果,可以避免由于主观因素所造
成的误差,但该试验对专业仪器要求较高,检测试剂比较昂贵,增加了检测成本,
此外检测过程中对环境温度的要求也较高,因此这些原因限制了 ELISA 的使用。
4. 荧光偏振试验(Fluorescence Polarization Assay,FPA)
荧光偏振分析技术是地标 DB65/T 4292-2020 中规定的牛羊布病抗体检测方
法,方法是用荧光素标记布氏菌抗原,并将其加入待测待检样品中。如果待测样
本中含有布鲁氏菌抗体,抗体便会与待测抗原结合,从而减低待测抗原的转动速
率。用荧光偏振检测仪可测定出抗原抗体复合物的转动速率的变化,经数据分析
从而测出结果。特点是分析物不需要进行分离,因而简便快捷,用于布病监测及
有效控制布病有重要意义。
5. 半抗原琼脂扩散试验(Native Hapent Gel Diffusion,NH-GD)
NH-GD 为中国兽医药品监察所国家动物布鲁氏菌病参考实验室推荐方法。
布鲁氏菌表面存在一种半抗原多糖(Native Hapent,NH),该抗原的分子量小,
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