Page 69 - 畜牧兽医疫病防控与技术分析

第四章 布鲁氏菌病防治技术

其他菌体形态或生长特征相似的细菌（苍白杆菌和假苍白杆菌除外）均为蓝色，
操作简单、便捷，常用于对布鲁氏菌的初步鉴定。

2. 生化鉴定
试验血培养阳性的培养物，在血平板上生长为小菌落，而在麦康凯平板不生
长，氧化酶触酶阳性，吲哚试验阴性，尿素酶实验阳性，即可初步判定为布鲁氏
菌。布鲁氏菌有多个生物种以及某些生物种有多个生物型，可通过生化反应和单
因子凝集实验进行区分。目前也有商品化生化鉴定卡可以实现培养和生化鉴定全

自动完成。但自动生化鉴定的结果可能会与人苍白杆菌、动物溃疡伯格菌等菌发
生混淆从而造成误判。
3. 飞行时间质谱（MALDI-TOFMS）
该技术是近年迅速发展和广泛应用的微生物快速鉴定技术，具有操作简单，

快速，准确，高通量的特点。其原理是细菌和基质液混合形成共结晶，在激光和
高压电场作用下，带电离子在真空管内快速移动从而获得样品的指纹图谱，并通
过与数据库中的图谱进行对比从而确定样品的种属。该技术能实现对布鲁氏菌的
准确快速鉴定，甚至通过聚类分群能把羊种、牛种和猪种进行区分。但可能由于

参照数据库不完善，在鉴定中也有将布鲁氏菌错误地鉴定为苍白杆菌的报道，因
此如果质谱鉴定结果为苍白杆菌，可能该菌是布鲁氏菌。在对布鲁氏菌涂靶板操
作前，为避免活菌暴露，常需要挑取细菌到乙醇溶液中灭活后再进行实验操作。
（四）核酸检测方法

1. 聚合酶链式反应
聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）是一种实验室最常用
的核酸检测方法，可以用于流行病学解释和分析，也可以用于分子表征。目前，
许多序列已经被确认是布鲁氏菌属特异性 PCR 分析的靶向序列，包括 Bcsp31、

Omp2、16SrRNA、IS711 和 16S—23S 区域，其操作过程复杂，经过变性、退火、
延伸多次循环之后，得到目标 DNA，再通过凝胶电泳成像观察，步骤多，耗时长，
影响因素多，只能用于定性实验研究。
2. 荧光定量 PCR

荧光定量 PCR（qPCR）是 PCR 检测的一种定量实验方法，具有快速性、重复
性、敏感性和特异性。在样本菌体含量很低的情况下，仍能检测出菌体核酸含量，
主要用于大量样本的筛查。通过荧光实时监测，收集检测每个循环过程中的荧光

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