Page 416 - 新编动物防疫检疫手册

1.4 轻弹微量反应板或用振荡器振荡，使反应板中的溶液混匀。
1.5 将微量反应板用封条封闭置于湿箱中（18 ～ 25℃）孵育 2 小时，也可以

将微量反应板用封条置于湿箱中孵育过夜。

1.6 吸出反应孔中的液体，并用稀释好的洗涤液洗涤 3 次，注意每次洗涤时
都要将洗涤液加满反应孔。

1.7 分别将 100uL 的抗 CSFV 酶标二抗（即取即用）加入反应孔中，用封条封

闭反应板并于室温下或湿箱中孵育 30 分钟。

1.8 洗板（见 1.6）后，分别将 100uL 的底物溶液加入反应孔中，于避光、室

温条件下放置 10 分钟。加完第一孔后即可计时。
1.9 在每个反应孔中加入 100uL 终止液终止反应。注意要按加酶标二抗的顺

序加终止液。

1.10 在 450nm 处测定样本以及对照的吸光值，也可用双波长（450nm 和
620nm）测定样本以及对照的吸光度值，空气调零。

1.11 计算样本和对照的平均吸光度值。计算方法如下：

计算被检样本的平均值 OD450（＝ ODTEST）、阳性对照的平均值（＝

ODPOS）、阴性对照的平均值（＝ ODNEG）。

根据以下公式计算被检样本和阳性对照的阻断率；
ODNEG- ODTEST
阻断率＝——————————×100%
ODNEG

2 试验有效性

阴性对照的平均 OD450 应大于 0.50。阳性对照的阻断率应大于 50%。

3 结果判定
如果被检样本的阻断率大于或等于 40％，该样本被判定为阳性（有 CSFV 抗

体存在）。如果被检样本的阻断率小于或等于 30％，该样本被判定为阴性（无

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