Page 411 - 新编动物防疫检疫手册

5 结果判定
取 RT-PCR 产物 5μL，于 1% 琼脂糖凝胶中电泳，凝胶中含 0.5μL /mL 溴化

乙锭，电泳缓冲液为 0.5×TBE，80V 30 分钟，电泳完后于长波紫外灯下观察拍照。

阳性对照管和样品检测管出现 251nt 的特异条带判为阳性；阴性管和样品检测管
未出现特异条带判为阴性。

附件 5

猪瘟抗原双抗体夹心 ELISA 检测方法

本方法通过形成的多克隆抗体 - 样品 - 单克隆抗体夹心，并采用辣根过氧化
物酶标记物检测，对外周血白细胞、全血、细胞培养物以及组织样本中的猪瘟病

毒抗原进行检测的一种双抗体夹心 ELISA 方法。具体如下：

1 试剂盒组成

1.1 多克隆羊抗血清包被板条 8 孔 ×12 条（96 孔）
1.2 CSFV 阳性对照，含有防腐剂 1.5mL

1.3 CSFV 阴性对照，含有防腐剂 1.5mL

1.4 100 倍浓缩辣根过氧化物酶标记物（100×）

辣根过氧化物酶标记抗鼠 IgG，含防腐剂 200uL
1.5 10 倍浓缩样品稀释液（10×） 55mL

1.6 底物液，TMB/H2O2 溶液 12mL

1.7 终止液，1M HCL（小心，强酸） 12mL

1.8 10 倍浓缩洗涤液（10×） 125mL
1.9 CSFV 单克隆抗体，含防腐剂 4mL

1.10 酶标抗体稀释液 15 mL

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