Page 220 - 临床医学检验理论与技术分析

第十二章 细胞病理学检验

结构，从而稳定细胞的形态与结构。固定时间一般根据标本类型和固定剂浓度而
定，通常在 10~30 分钟之间。固定完成后，将标本用流水充分冲洗，以去除残留
的固定剂，避免其对后续染色过程产生干扰。随后进入苏木精染色环节，将标本

浸入苏木精染液中，染色时间通常控制在 5~10 分钟，此过程需根据染液的新鲜
程度、温度以及标本的类型进行适当调整。染色完成后，再次用流水冲洗，以去
除未结合的苏木精染料。接着，将标本浸入分化液，常见的分化液为 1% 盐酸酒
精溶液，分化的目的是去除细胞核中过染的苏木精，使细胞核的染色更为清晰、

准确，分化时间一般为 30 秒 ~1 分钟，分化过程需在显微镜下密切观察，以确保
分化程度恰到好处。分化结束后，立即用流水冲洗，终止分化反应，随后进行蓝
化处理，即将标本浸入弱碱性溶液（如自来水或稀氨水）中，使苏木精染色后的
细胞核由红色转变为鲜艳的紫蓝色，蓝化时间约为 5~10 分钟。蓝化完成后，将

标本浸入伊红染液中，染色时间约为 3~5 分钟，使细胞质染上粉红色。最后，通
过梯度酒精（如 70%、80%、95%、100% 酒精）进行脱水处理，去除细胞内的水分，
使细胞结构更为清晰，脱水时间每个梯度约为 3~5 分钟。脱水完成后，用二甲苯
进行透明处理，使标本能够透光，便于在显微镜下观察，透明时间约为 5~10 分钟。

最后，使用中性树胶封片，将标本固定在载玻片上，防止标本受到外界污染和物
理损伤，至此完成苏木精 - 伊红染色的全部操作流程。
巴氏染色在细胞病理学检验，特别是妇科细胞学检查中具有不可替代的重要
价值。其原理基于多种染料与细胞内不同成分的特异性结合以及不同细胞类型对

染料的亲和性差异。巴氏染色使用的染液体系较为复杂，主要包括苏木精、橙黄
G6、EA36 或 EA50 等。苏木精在巴氏染色中的作用与 HE 染色类似，主要用于
染细胞核，使细胞核呈现出清晰的紫蓝色，以便观察细胞核的形态、大小、染色
质分布以及核仁等特征。橙黄 G6 主要对细胞浆中的角化细胞和角化前细胞具有

较强的亲和力，能够将这些细胞染成鲜艳的橙色，从而有助于识别和区分不同分
化程度的鳞状上皮细胞。EA36 或 EA50 则对不同类型的细胞浆具有特异性染色
作用，例如，鳞状上皮细胞的细胞质在 EA36 或 EA50 的作用下染成淡绿色或淡
蓝色，而柱状上皮细胞的细胞质则染成粉红色。通过这种多色染色体系，能够清

晰地区分不同类型的细胞，尤其是在宫颈细胞学检查中，对于正常鳞状上皮细胞、
柱状上皮细胞、癌前病变细胞以及癌细胞的鉴别具有极高的灵敏度和特异性。
巴氏染色的操作方法同样严谨且细致。首先，对细胞涂片进行固定处理，固

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