Page 224 - 临床医学检验理论与技术分析

第十二章 细胞病理学检验

悬液后方轻轻向前推，速度要均匀适中，过快易使细胞分布不均，过慢则可能导
致细胞堆积。涂抹法则适用于一些较浓稠的细胞标本，如痰液等，使用无菌竹签
或涂抹棒蘸取少量标本，在载玻片上轻轻均匀涂抹，涂抹面积不宜过大，一般控

制在载玻片的 1/3~1/2 范围内，且要保证涂抹厚度适宜，避免细胞重叠或过薄影
响观察。
固定环节对于保持细胞形态结构的完整性不可或缺。固定的目的是迅速终止
细胞内的各种代谢活动，防止细胞自溶和变形。常用的固定剂有酒精、甲醛等。

酒精固定作用迅速，能较好地保存细胞内的蛋白质和核酸，尤其适用于免疫细胞
化学染色前的固定，一般使用 95% 酒精固定 15~30 分钟。甲醛固定则能使细胞
内的蛋白质交联，稳定细胞结构，常用于常规的苏木精 - 伊红染色，固定时间通
常为 10~20 分钟。固定时，将载玻片完全浸入固定剂中，确保细胞充分接触固定

剂，且固定环境温度要适宜，一般在室温（20℃ ~25℃）下进行，避免温度过高
或过低影响固定效果。
染色是使细胞结构清晰显现的关键步骤。不同的染色方法，如苏木精 - 伊红
（HE）染色、巴氏染色等，有着各自的操作要点。以 HE 染色为例，固定后的

涂片经水洗去除固定剂后，先进行苏木精染色，苏木精染液的浓度和染色时间需
严格控制，一般染色 5~10 分钟，染色后水洗去除多余染液，再用 1% 盐酸酒精
溶液分化，分化时间约 30 秒 ~1 分钟，目的是去除细胞核中过染的苏木精，使细
胞核染色清晰准确，随后进行蓝化处理，将细胞核由红色转变为紫蓝色，常用自

来水或弱碱性溶液如稀氨水蓝化 5~10 分钟，最后进行伊红染色 3~5 分钟，使细
胞质染成粉红色，染色结束后经梯度酒精脱水、二甲苯透明，并用中性树胶封片。
整个染色过程中，染液的新鲜度、各步骤操作时间以及染色环境的 pH 值等因素
都会影响染色效果，需密切关注并精准把控。

二、细胞离心涂片技术

该技术的原理是利用离心机产生的强大离心力，将细胞悬液中的细胞快速沉
降到载玻片上。在离心过程中，细胞受到垂直向下的离心力，克服了细胞在悬液

中的布朗运动和重力作用，从而均匀地沉积在载玻片的特定区域。这种方式使得
原本分散在大量液体中的细胞能够集中在较小的面积上，显著提高了细胞浓度，
尤其适用于细胞含量较少的标本，如胸腹水、脑脊液等。通过控制离心速度、时

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