Page 56 - 临床医学检验理论与技术分析
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第二章 临床微生物与寄生虫检验
孢子的形态、大小、排列方式等微观特征进行细致观察,综合直接镜检和培养后
观察的结果,结合不同真菌的形态学特点,可对大多数常见真菌做出初步诊断。
核酸检测试剂盒的应用为真菌感染的快速诊断开辟了新路径,在临床实践中
发挥着日益重要的作用。这类试剂盒通常基于 PCR 技术或其他先进的核酸扩增
技术,具备较高的灵敏度和特异性。其设计原理是针对常见致病真菌的特异性基
因序列,精心设计引物和探针。在检测过程中,提取标本中的核酸,加入试剂盒
中的反应体系,若标本中存在相应真菌的核酸,引物可与模板 DNA 特异性结合,
在 DNA 聚合酶等酶类的作用下,通过核酸扩增反应,使真菌核酸大量增加。扩
增产物可通过荧光信号检测、电泳分析等方式进行检测和分析。例如,某些核酸
检测试剂盒采用实时荧光定量 PCR 技术,在扩增过程中实时监测荧光信号强度,
根据荧光信号的增长曲线,不仅能够定性判断标本中是否存在真菌核酸,还能对
真菌核酸进行定量分析,准确评估真菌的感染程度。在一些疑难真菌感染病例中,
传统的培养和形态学鉴定方法可能难以在短时间内明确诊断,此时核酸检测试剂
盒能够快速、准确地检测出标本中的真菌核酸,确定感染的真菌种类,为临床医
生制定治疗方案提供关键依据,尤其对于深部真菌感染和罕见真菌感染的诊断,
核酸检测试剂盒的优势更为显著,极大地提高了真菌感染的诊断效率和准确性。
三、真菌感染的药敏试验与抗真菌治疗
真菌药敏试验在抗真菌治疗中占据着关键地位,它能够为临床医生提供精准
的用药指导,从而提高抗真菌治疗的有效性。目前,真菌药敏试验的方法主要包
括常量肉汤稀释法、微量肉汤稀释法以及 E-test 法等。常量肉汤稀释法是将抗真
菌药物进行一系列倍比稀释,然后在每管稀释液中加入等量的真菌悬液,经过一
定时间的培养后,观察真菌的生长情况,以能够抑制真菌生长的最低药物浓度作
为最低抑菌浓度(MIC)。微量肉汤稀释法则是在 96 孔微量板中进行类似操作,
该方法更为简便、节省试剂,且能够同时对多种药物和多个菌株进行检测。E-test
法结合了纸片扩散法和稀释法的原理,使用含有呈连续浓度梯度分布抗真菌药物
的 E-test 条,将其贴在已接种真菌的琼脂平板上,经过培养后,根据抑菌圈与 E-test
条交界处的刻度读取 MIC 值,操作相对简便且结果较为准确。
真菌药敏试验的意义重大。一方面,它有助于临床医生准确选择对感染真菌
敏感的抗真菌药物,避免盲目用药。不同种类的真菌对各种抗真菌药物的敏感性
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