Page 54 - 临床医学检验理论与技术分析
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第二章 临床微生物与寄生虫检验
第三节 常见真菌感染的检验
一、真菌的检验方法
真菌培养技术堪称诊断真菌感染的基石,被视为“金标准”之一。在实际操
作中,需将临床获取的标本,如痰液、血液、组织等,精心接种于适宜的培养基之上,
沙氏培养基是常用选择之一。接种后,将培养基放置在特定的温度与湿度环境中
进行培养,不同真菌对培养条件的要求存在差异,一般需保持在 25℃ ~30℃,湿
度适中。在培养过程中,密切观察是否有真菌生长,不同真菌的生长特性各不相
同。念珠菌生长相对较快,通常在 24~48 小时内,培养基上可出现光滑、湿润、
呈乳白色的菌落,质地较为柔软,边缘整齐;曲霉菌的菌落则呈现出独特的形态,
多为绒毛状或棉絮状,颜色丰富多样,常见的有绿色、黄色、黑色等,其菌落生
长速度相对较慢,需培养数天方可观察到明显形态。通过对菌落形态、颜色、质
地等特征的细致观察,能够对真菌种类进行初步判断,为后续进一步鉴定提供重
要线索。
染色方法在真菌检验中发挥着不可或缺的作用,能够帮助检验人员更清晰地
观察真菌的形态与结构。常用的染色方法包括革兰染色、墨汁负染色、乳酸酚棉
蓝染色等。革兰染色是微生物检验中常用的染色技术,大多数真菌经革兰染色后
呈革兰阳性,在显微镜下可清晰观察到真菌细胞壁、细胞膜等结构,有助于判断
真菌的基本形态特征。墨汁负染色主要用于隐球菌的检测,其原理是利用墨汁的
黑色背景,衬托出隐球菌周围的透明荚膜,在显微镜下,隐球菌呈现为圆形或椭
圆形的菌体,周围环绕着一层明显的荚膜,这种独特的形态特征对于隐球菌的诊
断具有重要意义。乳酸酚棉蓝染色则聚焦于观察真菌的菌丝和孢子形态,将真菌
标本经过乳酸酚棉蓝染色后,在显微镜下,菌丝和孢子的形态、颜色、排列方式
等细节得以清晰展现,为真菌的鉴定提供了丰富的微观信息,有助于准确区分不
同种类的真菌。
生化反应作为真菌检验的重要辅助手段,基于不同真菌具有独特的生化特性
这一原理。通过检测真菌对各种糖类、醇类等物质的利用能力,以及其产生的特
定酶类,能够为真菌鉴定提供有利依据。以念珠菌和曲霉菌为例,念珠菌具备发
酵多种糖类的能力,在糖发酵试验中,若培养基中含有葡萄糖、麦芽糖等糖类物
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