Page 120 - 医学检验技术发展与创新

医学检验技术发展与创新
Development and Innovation of Medical Laboratory Technology

样发作、头痛等，基因检测是确诊 MELAS 综合征的重要标准。自 Goto 等于 1990
年首次报道 m.3243A>G 突变导致 MELAS 的病例，更多的 mtDNA 变异位点被发现，
如 m.3271T>C、m.3252A>G、m.3291T>C、m.3260A>G 等，其中大部分突变位于
mtDNA 的 tRNA 基因区域。

MERRF 综合征又称肌阵挛癫痫伴破碎红纤维综合征，是线粒体脑肌病的一
个亚型，患者多在儿童期发病。由于突变基因或位点不同，患者的临床表型各异，
以肌阵挛性癫痫发作为主要特征，可伴有智力减退、小脑共济失调等，此外，还
会出现如甲状腺功能减退等其他内分泌系统疾病。线粒体 DNA 突变导致线粒体

氧化磷酸化功能缺陷是发病的根本原因，m.8344A>G、m.8356T>C、m.8361G>A
和 m.8363G>A 是常见的致病性突变，其中 m.8344A>G 是 MERRF 相关的热点突变。
LHON 又称 Leber 遗传性视神经萎缩，该病于 1871 年首次报道，以双眼出
现无痛性视力下降为首发症状，随着病情进展，可出现显著的双侧视神经萎缩，

伴随或不伴随其他多系统症状，如运动障碍、癫痫、听力障碍等。约 95% 的
LHON 患者由 m.11778G>A、m.14484T>C 和 m.3460G>A 这三个点的突变引起。
Kearns-Sayre 综合征于 1958 年由 Kearns 和 Sayre 首次报道，是一种以慢性
进行性眼外肌麻痹、视网膜色素变性和心脏传导功能障碍三联征为主要特征的

线粒体脑肌病。KSS 最常见病因是由 DNA 的重排导致的线粒体 DNA 单个或多个
片段缺失，常见的致病性突变位点包括 m.4298G>A、m.4308G>A、m.5703G>A 和
m.12315G>A 等。
2. 线粒体病分子诊断技术

mtDNA 突变形式有多种，包括点突变、重复和缺失等，其中主要以点突
变为主。mtDNA 突变的检测方法主要包括 PCR-RFLP 和 PCR-ASO 等。对于
A3243G、T8993G 等常见的线粒体 DNA 点突变，通常使用 PCR-RFLP 法。该方
法是通过 PCR 扩增一段含有突变位点的 mtDNA，然后再使用合适的限制性内切

酶，酶切 PCR 产物，经琼脂糖凝胶电泳得到特异性的电泳谱带，野生型 mtDNA
所得的 PCR 产物会被切成 2 个片段，从而鉴定该位点是否发生突变。该方法较
简便，特异性高，适合同时检测多个样本，并且通过扫描野生型及突变型 DNA
条带信号强度可以粗略计算突变型 mtDNA 的比例。但此方法耗时，结果不稳定，

限制性内切酶可能消化不完全。此外，PCR-RFLP 法可能无法检测到低百分比
（<15%）的异质性。为了更有效地诊断线粒体病，可使用多重 PCR/ 等位基因

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