Page 77 - 畜牧兽医疫病防控与技术分析

第四章 布鲁氏菌病防治技术

呈显著差异（Velikovsky et al.2003）。相比单个重组亚单位疫苗，融合多个亚单
位或多个亚单位的疫苗策略具有好的优势，疫苗效力也显著提升。以重组核糖体
蛋白 rL7/L12 和重组膜蛋白 rOmp25 为抗原一同与氢氧化铝胶配成疫苗，接种小

鼠后可以诱导产生 Th2 型免疫反应，用 B.abortus.544 强毒攻击后，Omp25+L7/
L12 组小鼠比单个疫苗表现出更好的保护效力（Gupta et al.2020）。在一种疫
苗配方中结合几种抗原并不总是比使用单一抗原产生更高水平的保护。结合
Omp31 和 BSL 蛋白的抗原表位，构建了 rBLSOmp31 融合蛋白，与弗氏佐剂腹
腔接种后可以产生与 Rev.1 疫苗相当的保护效果，有效抵御 B.melitensis 和 B.ovis

强毒的攻击（Cassataro et al. 2007）。
2.DNA 疫苗
利用质粒携带保护性抗原开发 DNA 疫苗是开发更安全，有效疫苗的新型

疫苗策略，DNA 疫苗能同时诱导较强的细胞免疫和体液免疫。相较于布鲁氏菌
减毒活疫苗，DNA 疫苗具有更优越的前景，完全无感染风险，制备简单成本
低，可诱导较长的免疫反应等。针对布鲁氏菌免疫原性抗原的多种 DNA 疫苗
已经被验证，结果显示出较好的应用前景。以 pcDNA3 质粒为载体，插入目的

基因 BLS，成功构建 pcDNA-BLS 出 DNA 疫苗，接种小鼠后能刺激机体产生
较高滴度的 IL-2 和 IFN-γ，用 B.abortus.544 进行攻击，相较于对照组，免疫
组小鼠脾脏细菌载量显著减少，保护效力高于 rBLS 亚单位疫苗（Velikovsky et
al.2002）。这可能与 NDA 疫苗体内表达所得抗原的结构更贴近于抗原的天然结

构有关。但是不是所有的 DNA 疫苗的应用效果都由于重组亚单位疫苗，以布鲁
氏菌铁蛋白和 p39 蛋白为靶标构建质粒 pCIBFR、pCIP39，接种小鼠后用强毒菌
株进行攻击，以 pCIP39 为抗原 NDA 疫苗可以有效抵御攻击，而 pCIBFR 组小鼠
保护效果较差（Tuomanenet al. 2001），这与之前报道的重组布鲁氏菌 P39 蛋白

和铁蛋白亚单位疫苗的验证结果有很大差异（Al-Mariri et al.2001）。
因此，布鲁氏菌 DNA 疫苗需进一步提升效力，有学者通过增加抗原基因数
量来提升布鲁氏菌 DNA 疫苗效力。与表达单个抗原的 DNA 疫苗相比，L7/L12
蛋白和 Omp16 蛋白融合的 DNA 疫苗在小鼠中产生了更高水平的保护（Luo，

Ni，etal.2006a）。另一项研究将 L7/L12 和 P39 基因融合构成 DNA 疫苗，试验
验证结果与单独编码单独成分的 DNA 疫苗相比，该 DNA 疫苗显著提高了保护
作用（Luo，Li，etal.2006）。与减毒活疫苗 S19 相比，BSCP31、Cu/ZnSOD 和

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