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Clinical Medical Laboratory Theory and Technical Analysis
临床医学检验理论与技术分析
需进行抗原修复,因为在标本固定过程中,部分抗原表位可能被封闭,抗原修复
能够使这些被封闭的抗原表位重新暴露,提高抗原与抗体的结合效率。常用的抗
原修复方法有热修复法(如高压锅修复、水浴修复)和酶消化法。修复完成后,
进行抗体孵育,将稀释好的一抗滴加在标本上,放入湿盒中,在适宜温度(通常
为 37℃或 4℃过夜)下孵育,使一抗与抗原充分结合。孵育结束后,用缓冲液冲
洗标本,去除未结合的一抗,然后加入二抗,二抗能够与一抗特异性结合,且二
抗通常带有标记物。再次孵育后,冲洗标本,随后根据标记物的类型进行显色反
应。若为酶标记,加入相应底物进行显色;若为荧光标记,则直接在荧光显微镜
下观察。最后,对标本进行复染,常用苏木精复染细胞核,使细胞结构更加清晰,
便于观察和分析。
免疫组化技术在细胞病理学诊断中具有不可替代的重要性。它能够明确细
胞的来源和分化程度,例如在肿瘤诊断中,通过检测特定的细胞角蛋白,可判断
肿瘤细胞是否来源于上皮组织;检测波形蛋白,有助于判断肿瘤细胞是否具有间
叶组织来源。免疫组化技术还能辅助肿瘤的分类和分型,如通过检测雌激素受体
(ER)、孕激素受体(PR)和人表皮生长因子受体 2(HER-2)等标志物,对乳
腺癌进行分子分型,为临床治疗方案的选择提供关键依据。在淋巴瘤的诊断中,
免疫组化可检测不同的淋巴细胞标志物,准确区分淋巴瘤的亚型。此外,免疫组
化技术对于微小转移灶的检测也具有重要意义,能够发现常规病理检查难以察觉
的微小肿瘤细胞转移,为肿瘤的分期和预后评估提供更准确的信息。
以乳腺癌诊断为例,免疫组化检测 ER、PR 和 HER-2 是乳腺癌精准治疗的
基础。若 ER 和(或)PR 阳性,提示肿瘤细胞对内分泌治疗可能敏感,可采用
内分泌治疗药物进行治疗;若 HER-2 过表达,可使用针对 HER-2 的靶向治疗药物,
如曲妥珠单抗,显著提高治疗效果。在肺癌诊断中,通过免疫组化检测甲状腺转
录因子 1(TTF-1),若 TTF-1 阳性,提示肿瘤可能为肺腺癌,有助于肺癌的病
理分型和治疗方案的制定。
五、分子生物学技术在细胞病理学中的应用
分子生物学技术在细胞病理学检验中异军突起,以其对细胞分子层面的深入
剖析,为疾病的诊断、治疗和预后评估提供了更为精准和深入的信息,其中聚合
酶链式反应(PCR)和荧光原位杂交(FISH)技术应用尤为广泛。
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