Page 228 - 临床医学检验理论与技术分析

第十二章 细胞病理学检验

PCR 技术的应用原理基于 DNA 的体外扩增。细胞内的 DNA 在高温下会变
性解链，形成单链 DNA。当温度降低时，人工合成的引物能够与单链 DNA 上特
定的靶序列互补结合，然后在 DNA 聚合酶的作用下，以单链 DNA 为模板，从

引物的 3' 端开始延伸，合成新的 DNA 链。通过不断重复变性、退火和延伸这三
个步骤的循环，靶 DNA 序列能够呈指数级扩增。在细胞病理学检验中，PCR 技
术可用于检测细胞内特定的基因序列，如肿瘤相关基因的突变、病毒基因的存在
等。例如，在结直肠癌的诊断中，通过 PCR 技术检测 KRAS、NRAS 等基因的

突变情况，对于指导靶向治疗具有重要意义。若 KRAS 基因存在突变，患者可
能不适合使用针对表皮生长因子受体（EGFR）的靶向治疗药物，因为 KRAS 基
因突变会导致 EGFR 下游信号通路持续激活，使靶向 EGFR 的药物无法发挥作用。
FISH 技术则是利用荧光标记的核酸探针与细胞内特定的核酸序列进行杂

交。核酸探针是一段已知序列的单链 DNA 或 RNA，其能够与细胞内与之互补
的核酸序列特异性结合。在细胞病理学检验中，FISH 技术常用于检测基因的扩
增、缺失以及染色体的易位等异常情况。在乳腺癌诊断中，FISH 技术可用于检
测 HER-2 基因的扩增情况。将荧光标记的 HER-2 基因探针与乳腺癌细胞进行杂

交，在荧光显微镜下观察，若 HER-2 基因出现扩增，会观察到细胞核内有多个
荧光信号聚集，提示 HER-2 基因扩增阳性。这对于判断乳腺癌患者是否适合使
用 HER-2 靶向治疗药物至关重要，HER-2 基因扩增阳性的患者使用 HER-2 靶向
治疗药物往往能取得较好的治疗效果。在淋巴瘤诊断中，FISH 技术可用于检测

染色体易位，如在 Burkitt 淋巴瘤中，通过 FISH 技术检测到 MYC 基因与免疫球
蛋白重链基因（IGH）的易位，这是 Burkitt 淋巴瘤的特征性遗传学改变，对于淋
巴瘤的准确诊断和分型具有重要价值。

六、细胞病理学检验技术的新进展

液基薄层细胞学技术是对传统细胞学涂片技术的重大革新。传统细胞学涂片
常存在细胞重叠、杂质干扰等问题，影响诊断的准确性。液基薄层细胞学技术则
通过特殊的技术手段，将采集到的细胞标本放入特殊的保存液中，经过震荡、过

滤等处理，去除杂质和红细胞等干扰成分，然后利用离心或过滤等方法将细胞均
匀地转移到载玻片上，形成薄层细胞涂片。这种涂片细胞分布均匀，背景清晰，
大大提高了细胞的检出率和诊断的准确性。在宫颈癌筛查中，液基薄层细胞学技

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