Page 139 - 医学检验技术发展与创新

第四章 分子诊断临床应用

FISH 检测，确定胎儿所携带的基因缺失是新突变。蔡美英等将 BACs-on-Beads
技术与 FISH 技术联用，作为一种新的检测 22q11 微缺失的方法。
除了传统的 FISH 技术外，新型技术也在逐步应用于临床。mFISH 是一种通
过使用多种不同的配体或荧光色体进行 DNA 特定标记的技术。Mu-rakami 等应

用 mFISH 方法针对 Pallister-Killian 综合征（PKS）进行了产前诊断。PKS 是由于
组织特异性嵌合等臂 12p 染色体所导致的遗传病，研究者通过羊膜穿刺法获取脐
带淋巴细胞标本，用 mFISH 进行染色体分析并诊断。Pietrzyk 等采用微流体 FISH
（microfluidics-FISH）技术进行染色体非整倍性检测，与传统 FISH 相比，这种

方法检测快速，更加高效。
在产前诊断中，PCR 技术因能对靶片段指数扩增并呈高度特异性杂交，应
用最为广泛。染色体多态性位点的短串联重复序列（short tandem repeats，STR）
作为遗传标记，经 PCR 扩增获得 DNA 二维图谱，根据图谱上正常人与患者峰

值的差异可以进行诊断。迄今已有大量研究采用 STR 与荧光定量聚合酶链反应
（QFPCR）联用的方法进行胎儿非整倍体的产前诊断。秦胜芳等收集 6066 份羊
水，通过对 13、18、21、X 和 Y 染色体上的 STR 进行 QFPCR 检测，检出 135 例
染色体数目异常，与核型分析结果一致。Kozaric 等比较了 QFPCR 与核型分析的

优势，发现在针对常见染色体非整倍性的检测中，QFPCR 方法更加快速且可靠，
但在其他染色体异常的检测中，2 种诊断手段应结合使用。
传统的侵入性诊断有母系污染的可能，对于诊断有一定影响，此外也有造成
流产的风险。为了解决这些问题，无创产前筛查（non-invasive prenatal testing，

NIPT）得到迅速发展，ddPCR 因其高敏感度在 NIPT 领域应用广泛。一项针对
21 三体综合征的前瞻性研究中，对 213 名孕妇同时进行侵入性诊断及 NIPT，
在 DNA 含量低至 5% 时，ddPCR 仍能准确检测出异常，成功开发了一种基于
ddPCR 的 NIPT 手段。Chang 等利用 ddPCR 及基于芯片的 dPCR 技术开发了一种

诊断单基因疾病的 NIPT 方法，该方法通过母体外周血中的游离 DNA（circulating
cell free DNA，cfDNA）即可预测胎儿基因型。
多 重 连 接 依 赖 探 针 扩 增（multiples ligation-dependent probe amplification，
MLPA）是一种高灵敏的相对定量技术，通过探针和靶 DNA 的杂交，扩增产物经

毛细管电泳分析，主要用于检测基因片段的缺失和重复或检测染色体数目。它具
备信息量大、操作简便、重复性好的优点。高通量连接探针扩增技术（HLPA）

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