Page 143 - 医学检验技术发展与创新

第四章 分子诊断临床应用

南医院强烈推荐应用 RT-PCR 法检测 SARS-CoV-2 基因组作为呼吸道病原学检
测的方法。香港大学和大兴疾病预防控制中心设计了 2 个靶向 COVID-19 的高度
保守的 ORF1b 和 N 基因区域的实时 RT-PCR 检测方法，并应用了一组阳性和阴
性对照评估了测定，还对 2 例疑似患者进行了检测，结果为阳性。武汉市金银潭

医院和上海交通大学在对武汉市 99 例 COVID-19 患者进行分析，应用实时 RT-
PCR 对病人上呼吸道咽拭子样本进行检测。中国疾病预防控制中心也发表了关于
COVID-19 的早期调查，同样是通过分离病毒提取核酸，采用 RT-PCR 技术检测
病毒 RNA。当然，由于 PCR 的高灵敏度，PCR 检测会出现因样品污染而导致的

假阳性现象，或是因样品质量不佳或病毒基因组在探针处变异而导致的假阴性现
象。所以目前临床上也采用血清学检测进行辅助诊断，如酶联免疫吸附试验、胶
体金法等。
综上所述，分子诊断的临床广泛应用对疾病预防、诊断、预估预后、制定

个体化医疗方案等起着促进作用。随着我国人口老龄化的进程，癌症、慢性病等
发病率会持续升高，同时国民健康意识也在逐渐提升。分子诊断技术将呈现自动
化趋势，以减少人工消耗，降低成本，检测结果自动化判读也会减低人工误差。
同时，单分子技术的突破也使得检测高灵敏度成为分子诊断技术未来发展趋势，

提升检测效率。另外，无创检测及微创检测等检测手段会提高患者依从性，利于
分子诊断技术在临床中的进一步推广和应用。未来几年，分子诊断技术将更加广
泛地应用到体检、重大疾病早期诊断、预防及治疗中。

二、高通量测序在临床分子诊断中的应用

DNA 和 RNA 测序技术的发展加速了人们对遗传病分子特征的认识。应用高
通量测序，即下一代测序（next generation sequencing，NGS）技术检测疾病的遗
传学特征已经成为当前精准医学的重要组成部分。对于单基因遗传病，以往临
床实验室主要借助于 Sanger 测序、等位基因特异性聚合酶链反应（allele-specific

polymerase chain reaction，AS-PCR）、荧光原位杂交、DNA 印迹杂交等技术进行
检验。随着致病基因的不断发现，特别是针对癌症、心血管疾病、肾病、糖尿病
等复杂性疾病，传统的遗传学检测方法已经不能满足临床分子诊断对检测技术的

需求，而 NGS 技术以其高效、廉价的特点则恰恰显示出在这个领域的技术优势。
简单地说，NGS 技术能够通过 1 次实验对多个基因进行检测，同时具有所需样本

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