Page 148 - 医学检验技术发展与创新

医学检验技术发展与创新
Development and Innovation of Medical Laboratory Technology

通量数据处理能力的不断提高，必将为临床遗传性疾病的诊断与治疗带来变革。

三、分子诊断技术在病原微生物检测中的应用

医学流行性和食源性病原微生物，包括原生生物、病毒和细菌等，其种类

繁多且变异迅速，近年来已构成了严重的公共卫生安全隐患，给人类健康和财产
安全造成了巨大威胁和损失。针对病原微生物的快速检测技术，不仅是其有效防
控的前提，也是科学用药的基础。然而传统微生物检测和鉴定方法主要依赖于病
原微生物分离、培养和形态学观察、生理生化特征和血清免疫学反应等，这些方
法均存在诸多局限性，如微生物培养费时费力，仅能检测活菌总数；易受环境因

素影响及部分病原微生物难或不可培养等；大量严重耐药性菌株以及新病原微生
物的不断出现等，已成为科研人员亟待解决的问题。
目前国内外病原微生物检测技术正逐渐向分子诊断、代谢组学、指纹图谱、

DNA 传感器及仪器自动化等方向发展。其中分子诊断技术是利用分子生物学方
法对病原微生物核酸进行检测，不仅有效弥补了传统方法的不足，还可为研究人
员提供病原微生物的耐药基因，甚至同源性分析等。前期与此有关的研究主要集
中在聚合酶链式反应（PCR）及由其衍生的一系列技术，这些技术还存在操作繁
琐和假阳性高等问题，如核酸杂交和免疫 PCR 等。近年来，一系列新型分子诊

断技术不断涌现，既缩短了检测周期，降低了检测成本，又极大提高了病原微生
物检测和诊断的准确度和灵敏度，广受省部级以上国家级检测部门的青睐，如定
量 PCR、数字 PCR、环介导等温扩增、基因芯片、DNA 传感器、核酸适配体和

高通量测序技术等。
（一）基于杂交的分子诊断技术
1. 核酸杂交技术
该技术是将已知序列的核酸单链进行放射或非放射性标记，制成核酸探针
后再与样品中互补链按碱基配对原则进行严格杂交，根据有无杂交信号，判断

样品中有无目标病原微生物。核酸杂交分为原位杂交、斑点杂交、Sourthern 和
Northern 杂交等，杂交过程需探针且均依赖于复性动力学。目前较为常用的核
酸杂交方法是荧光原位杂交技术（FISH)，它是通过某种分子的荧光探针与染

色体 DNA 互补序列原位杂交，然后激发探针荧光以检测信号，从而实现对该
分子的定性和相对定量分析。FISH 操作简单、成本低、特异性强，可直接通过

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