Page 149 - 医学检验技术发展与创新

第四章 分子诊断临床应用

16SrRNA 检测可培养和不可培养微生物，但对 16SrRNA 序列未知的微生物无法
检测。另外，样品自身荧光及荧光染料的自我衰减等也会影响 FISH 结果。吴青
针对金黄色葡萄球菌 16SrRNA 特异性探针，建立了基于 FISH 的金黄色葡萄球菌
检测和评价方法，并与传统微生物培养法进行了比较，结果表明 FISH 在敏感性、

特异性和准确度等方面，完全可用于金黄色葡萄球菌检测，且适合少量样本。
2. 基因芯片技术
基因芯片，又称 DNA 芯片或 DNA 微阵列，其技术基础是核酸分子杂交。
通常采用光导原位合成或微量点样等方法，将大量核酸探针分子密集有序的排列

在 2cm2 支持物（相应处理的玻璃片、硅片和硝酸纤维素膜等）表面，加入已标
记样品分子进行多元杂交，通过分析杂交信号强弱和分布，同时辅以计算机软件
进行图像信息处理，可判断样品中是否存在病原微生物及其数量等信息。与传统
检测技术相比，基因芯片克服了原位杂交存在的检测通量低和依赖人工等缺点，

具有快速简便、特异性强、灵敏性高和高通量化等特点，但该技术成本较高、芯
片制作复杂，涉及微电子、微机械和计算机等技术，目前不宜在基层推广使用。
随着毒力基因和耐药基因等种属特异性基因不断被发现，基因芯片技术将有更多
的靶基因供选择，这将有助于推动该技术的广泛使用，其结果也更加灵敏准确。

陈昱分别根据志贺氏菌 ipa H 基因、沙门氏菌 stn 基因和大肠杆菌 O157slt
基因设计引物和探针，经过三重 PCR 后将产物与特异性探针杂交，对 7 种细菌
共 26 株菌进行芯片检测，最终仅 3 种菌为阳性结果。李海燕建立基于纳米复合
探针的基因芯片膜转印核酸检测方法，对结核分枝杆菌核酸浓度的检测可低至

1pmol/L。崔鹤馨建立了一种可同时检测样品中低滴度腺病毒、鼻病毒以及呼吸
道合胞病毒的基因芯片，有望为临床提供确诊依据。
3. DNA 传感器技术
DNA 传感器以核酸杂交为基础，DNA 为敏感元件，首先将序列已知的一条

单链 DNA 固定在传感器上，与样品中相应的互补单链 DNA 进行杂交，通过信号
转换器将其浓度转换为光或电等可检测信号。DNA 传感器主要由识别元件和信
号转换器两部分组成，根据其敏感元件主要分为免疫传感器和 DNA 传感器两类，
其中 DNA 传感器具有快速准确等特点，但存在灵敏度不高和特异性不强等缺点。

鲁卫平将真菌核糖体分型技术、DNA 生物传感器技术和纳米金信号放大技术相
结合，建立了一种真菌检测 DNA 传感器检测系统，检测过程可在 6h 内完成，而

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