Page 263 - 新编动物防疫检疫手册

附件 3
神经氨酸酶抑制（NI）试验

神经氨酸酶是流感病毒的两种表面糖蛋白之一，它具有酶的活性。NA 与底物

（胎球蛋白）混合，37℃温育过夜，可使胎球蛋白释放出唾液酸，唾液酸经碘酸

盐氧化，经硫代巴比妥酸作用形成生色团，该生色团用有机溶剂提取后便可用分
光光度计测定。反应中出现的粉红色深浅与释放的唾液酸的数量成比例，即与存

在的流感病毒的数量成比例。

在进行病毒 NA 亚型鉴定时，当已知的标准 NA 分型抗血清与病毒 NA 亚型一

致时，抗血清就会将 NA 中和，从而减少或避免了胎球蛋白释放唾液酸，最后不
出现化学反应，即看不到粉红色出现，则表明血清对 NA 抑制阳性。

该试验可用于分离株 NA 亚型的鉴定，也可用于血清中 NI 抗体的定性测定。

1 溶液配置

1.1 胎球蛋白：48-50mg/ml；
1.2 过碘酸盐：4.28 克过碘酸钠 +38 ml 无离子水 +62 ml 浓正磷酸，充分混合，

棕色瓶存放；

1.3砷试剂：10克亚砷酸钠+7.1克无水硫酸钠+100 ml无离子水+0.3 ml 浓硫酸；

1.4 硫代巴比妥酸：1.2 克硫代巴比妥酸 +14.2 克无水硫酸钠 +200 ml 无离子水，
煮沸溶解，使用期一周。

2 操作方法

2.1 按下图所示标记试管

○ ○ ○ ○
N1 原液 N1 10 倍 N1 100 倍 N1 1000 倍

○ ○ ○ ○

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