Page 260 - 新编动物防疫检疫手册
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摇匀后加入）见附录 B。
3.6 振荡混匀，在室温（20 ～ 25℃）下静置 40min 后观察结果（如果环境温
度太高，可置 4℃环境下反应 1 小时）。对照孔红细胞将呈明显的钮扣状沉到孔底。
3.7 结果判定 将板倾斜，观察血凝板，判读结果（见下表）。
表 1：血凝试验结果判读标准
类别 孔 底 所 见 结果
1 红细胞全部凝集，均匀铺于孔底，即 100% 红细胞凝集 ++++
2 红细胞凝集基本同上，但孔底有大圈 +++
3 红细胞于孔底形成中等大的圈，四周有小凝块 ++
4 红细胞于孔底形成小圆点，四周有少许凝集块 +
5 红细胞于孔底呈小圆点，边缘光滑整齐，即红细胞完全不凝集 -
能使红细胞完全凝集（100% 凝集，++++）的抗原最高稀释度为该抗原的血
凝效价，此效价为 1 个血凝单位（HAU）。注意对照孔应呈现完全不凝集（-），
否则此次检验无效。
4 血凝抑制（HI）试验（微量法）
4.1 根据 3 的试验结果配制 4HAU 的病毒抗原。以完全血凝的病毒最高稀释倍
数作为终点，终点稀释倍数除以 4 即为含 4HAU 的抗原的稀释倍数。例如，如果
血凝的终点滴度为 1：256，则 4HAU 抗原的稀释倍数应是 1：64（256 除以 4）。
4.2 在微量反应板的 1 孔～ 11 孔加入 0.025mL PBS，第 12 孔加入 0.05mL
PBS。
4.3 吸取 0.025mL 血清加入第 1 孔内，充分混匀后吸 0.025mL 于第 2 孔，依次
对倍稀释至第 10 孔，从第 10 孔吸取 0.025mL 弃去。
4.4 1 孔 ～ 11 孔 均 加 入 含 4HAU 混 匀 的 病 毒 抗 原 液 0.025mL， 室 温（ 约
20℃）静置至少 30min。
4.5 每孔加入 0.025mL 体积分数为 1% 的鸡红细胞悬液混匀，轻轻混匀，静置
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