Page 259 - 新编动物防疫检疫手册
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1 阿氏（Alsevers）液配制
称量葡萄糖 2.05g、柠檬酸钠 0.8g、柠檬酸 0.055g、氯化钠 0.42g，加蒸馏水
至 100mL，散热溶解后调 pH 值至 6.1，69kPa 15min 高压灭菌，4℃保存备用。
2 10% 和 1% 鸡红细胞液的制备
2.1 采血 用注射器吸取阿氏液约 1mL，取至少 2 只 SPF 鸡（如果没有 SPF 鸡，
可用常规试验证明体内无禽流感和新城疫抗体的鸡），采血约 2 ～ 4mL，与阿氏
液混合，放入装 10mL 阿氏液的离心管中混匀。
2.2 洗涤鸡红细胞 将离心管中的血液经 1500 ～ 1800 r/min 离心 8 分钟，弃上
清液，沉淀物加入阿氏液，轻轻混合，再经 1500 ～ 1800 r/min 离心 8 分钟，用吸
管移去上清液及沉淀红细胞上层的白细胞薄膜，再重复 2 次以上过程后，加入阿
氏液 20 mL，轻轻混合成红细胞悬液，4℃保存备用，不超过 5 天。
2.3 10% 鸡红细胞悬液 取阿氏液保存不超过 5 天的红细胞，在锥形刻度离心
管中离心 1500 ～ 1800 r/min 8 分钟，弃去上清液，准确观察刻度离心管中红细胞
体积（mL），加入 9 倍体积（mL）的生理盐水，用吸管反复吹吸使生理盐水与红
细胞混合均匀。
2.4 1% 鸡红细胞液 取混合均匀的 10% 鸡红细胞悬液 1 mL，加入 9 mL 生理
盐水，混合均匀即可。
3 抗原血凝效价测定（HA 试验，微量法）
3.1 在微量反应板的 1 孔～ 12 孔均加入 0.025mL PBS，换滴头。
3.2 吸取 0.025mL 病毒悬液（如感染性鸡胚尿囊液）加入第 l 孔，混匀。
3.3 从第 1 孔吸取 0.025mL 病毒液加入第 2 孔，混匀后吸取 0.025mL 加入第 3 孔，
如此进行对倍稀释至第 11 孔，从第 11 孔吸取 0.025mL 弃之，换滴头。
3.4 每孔再加入 0.025mL PBS。
3.5 每孔均加入 0.025mL 体积分数为 1% 鸡红细胞悬液（将鸡红细胞悬液充分
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