Page 261 - 新编动物防疫检疫手册
P. 261
约 40min(室温约 20℃,若环境温度太高可置 4℃条件下进行),对照红细胞将
呈现钮扣状沉于孔底。
4.6 结果判定
以完全抑制 4 个 HAU 抗原的血清最高稀释倍数作为 HI 滴度。
只有阴性对照孔血清滴度不大于 21og2,阳性对照孔血清误差不超过 1 个滴度,
试验结果才有效。HI价小于或等于21og2判定HI试验阴性;HI价等于31og2为可疑,
需重复试验;HI 价大于或等于 41og2 为阳性。
附件 2
琼脂凝胶免疫扩散(AGID)试验
A 型流感病毒都有抗原性相似的核衣壳和基质抗原。用已知禽流感 AGID 标
准血清可以检测是否有 A 型流感病毒的存在,一般在鉴定所分禽的病毒是否是 A
型禽流感病毒时常用,此时的抗原需要试验者自己用分离的病毒制备;利用 AGID
标准抗原,可以检测所有 A 型流感病毒产生的各个亚型的禽流感抗体,通常在禽
流感监测时使用(水禽不适用),可作为非免疫鸡和火鸡感染的证据,其标准抗
原和阳性血清均可由国家指定单位提供。流感病毒感染后不是所有的禽种都能产
生沉淀抗体。
1 抗原制备
1.1 用含丰富病毒核衣壳的尿囊膜制备。从尿囊液呈 HA 阳性的感染鸡胚中提
取绒毛尿囊膜,将其匀浆或研碎,然后反复冻融三次,经 1000r/m 离心 10 分钟,
弃沉淀,取上清液用 0.1% 福尔马林或 1%β- 丙内酯灭活后可作为抗原。
1.2 用感染的尿囊液将病毒浓缩或者用已感染的绒毛尿囊膜的提取物,这些抗
原用标准血清进行标定。将含毒尿囊液以超速离心或者在酸性条件下进行沉淀以
251
251

