Page 262 - 新编动物防疫检疫手册

浓缩病毒。
酸性沉淀法是将 1.0mol/LHCl 加入到含毒尿囊液中，调 pH 值到 4.0，将混合

物置于冰浴中作用 1 小时，经 1000r/m，4℃离心 10 分钟，弃去上清液。病毒沉淀

物悬于甘氨 - 肌氨酸缓冲液中（含 1% 十二烷酰肌氨酸缓冲液，用 0.5 mol/L 甘氨
酸调 pH 值至 9.0）。沉淀物中含有核衣壳和基质多肽。

2 琼脂板制备

该试验常用 1g 优质琼脂粉或 0.8 ～ 1g 琼脂糖加入 100 mL0.01mol/L、pH 值 7.2

的 8% 氯化钠 - 磷酸缓冲液中，水浴加热融化，稍凉（60 ～ 65℃），倒入琼脂板

内（厚度为 3mm），待琼脂凝固后，4℃冰箱保存备用。用打孔器在琼脂板上按 7
孔梅花图案打孔，孔径约 3 mm ～ 4mm，孔距为 3mm。

3 加样

用移液器滴加抗原于中间孔，周围 1、4 孔加阳性血清，其余孔加被检血清，
每孔均以加满不溢出为度，每加一个样品应换一个滴头，并设阴性对照血清。

4 感作

将琼脂板加盖保湿，置于 37℃温箱。24 ～ 48 小时后，判定结果。

5 结果判定

5.1 阳性。阳性血清与抗原孔之间有明显沉淀线时，被检血清与抗原孔之间也
形成沉淀线，并与阳性血清的沉淀线末端吻合，则被检血清判为阳性。

5.2 弱阳性。被检血清与抗原孔之间没有沉淀线，但阳性血清的沉淀线末端向

被检血清孔偏弯，此被检血清判为弱阳性（需重复试验）。
5.3 阴性。被检血清与抗原孔之间不形成沉淀线，且阳性血清沉淀线直向被

检血清孔，则被检血清判为阴性。

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