Page 169 - 临床医学检验理论与技术分析

Clinical Medical Laboratory Theory and Technical Analysis
临床医学检验理论与技术分析

二、血涂片染色的原理与方法

瑞氏染色的原理基于物理吸附和化学亲和作用。瑞氏染液由酸性染料伊红和
碱性染料亚甲蓝组成。血细胞内的不同成分对酸性和碱性染料的亲和力不同，酸

性物质如血红蛋白、嗜酸性颗粒等与碱性染料亚甲蓝结合，染成蓝色或紫蓝色；
碱性物质如细胞核蛋白、淋巴细胞胞质等与酸性染料伊红结合，染成红色；而中
性物质如中性粒细胞的颗粒等，既含酸性成分又含碱性成分，与两种染料均有亲
和力，染成淡紫红色。瑞氏染液的配制较为关键，一般将瑞氏染料粉末 0.1~0.5

克溶解于 60~100 毫升甲醇中，充分搅拌使其完全溶解，过滤后备用。甲醇不仅
是溶剂，还具有固定细胞的作用，可防止细胞在染色过程中变形。在染色过程中，
先将血涂片用甲醇固定 3~5 分钟，待甲醇挥发后，滴加瑞氏染液覆盖血涂片，染
色时间一般为 3~5 分钟，使细胞初步着色。然后滴加等量或稍多的缓冲液与染液

混合，继续染色 5~10 分钟，缓冲液的作用是维持染液的 pH 值在一定范围内（通
常为 6.4~6.8），保证染色效果。染色结束后，用流水冲洗血涂片，冲洗时间约
30~60 秒，冲洗时水流要轻柔，避免冲掉细胞，待血涂片自然干燥后即可进行显

微镜观察。
吉姆萨染色原理与瑞氏染色类似，也是基于细胞成分对染料的不同亲和力。
吉姆萨染液主要由天青、伊红等组成。其染色机制是细胞中的 DNA 与天青结合，
RNA 与伊红结合，从而使细胞核染成紫红色，细胞质染成淡蓝色或粉红色。吉
姆萨染液配制时，将吉姆萨染料粉末 0.5 克溶解于 33 毫升甘油中，置于 56℃水

浴中保温 2 小时，使染料充分溶解，然后加入 67 毫升甲醇，混匀后过滤备用。
染色时，先将血涂片用甲醇固定 3~5 分钟，再将血涂片浸入稀释后的吉姆萨染液
中，稀释比例一般为 1 ∶ 10~1 ∶ 20，染色时间较长，通常为 30~60 分钟。染色

后取出血涂片，用流水冲洗干净，待干燥后进行观察。吉姆萨染色对细胞核和寄
生虫的着色效果较好，常用于疟原虫、黑热病病原体等的检查以及白血病细胞的
鉴别诊断。
在血涂片染色过程中，无论是瑞氏染色还是吉姆萨染色，都有一些共同的注
意事项。染色液要现用现配，避免染液放置时间过长导致染料沉淀或变质，影响

染色效果。染色时间应根据染液浓度、室温等因素适当调整，如染液浓度低或室
温较低时，可适当延长染色时间；反之，缩短染色时间。染色过程中要注意保持

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