Page 63 - 医学检验技术发展与创新
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第三章 血液病检验与诊断
(三)酯酶染色
酯酶是具有较大 PH 范围的水解酶类,存在于许多血细胞内。根据酯酶对底
物作用的选择可分为特异性酯酶和非特异性酯酶两大类。前者为粒细胞系统的标
志酶,后者为单核细胞系统的标志酶。两种酶的作用原理是相同的。反应中由于
不同底物中都有一种萘酚基因,在受到细胞内相应的酯酶水解后,酚基因游离,
然后与孵育液中的重氮盐发生偶氮偶联反应,生成不溶性的有色沉淀,沉着于胞
浆中有酯酶活性的部位。
1. 氯醋酸 AS-D 萘酚酯酶染色
此酶是存在于粒细胞内的特异性酯酶,随细胞的成熟其阳性强度也增加。
在 M3 时该酶反应最强,M2 次之,M1 最弱。故具有独特的诊断价值。由于单核
细胞缺乏此酶,多为阴性。M4 可以是阳性,其阳性强度取决于原粒细胞数量与
分化程度。分化好的原粒为阳性,原幼单多为阴性,急淋全部为阴性。另外氯醋
酸 AS-D 萘酚酯酶持续呈阳性反应,提示病情恶化。所以也是急性白血病一个动
态观察指标。此酶反应结果与 POX、苏丹黑 B 结果相平行,三者联合应用,有
助于 M2M3M4M5 的鉴别。
2.α- 丁酸萘酚酯酶染色
此酶是存在于单核细胞内的特异性酯酶,细胞浆内酯酶活性部位呈弥漫性
暗红色,单核细胞与巨噬细胞呈强阳性。较 α- 醋酸萘酚对单核细胞更为特异。
巨核细胞、淋巴细胞为弱阳性,粒细胞为阴性。
3. 酯酶双染色
常规的细胞化学染色法只能显示出一种化学成分,比较单一,20 世纪 70 年
代,国外 Yam 创用了联合细胞化学染色法,有些 AML 原始细胞的单相染色氯醋
酸 AS-D 萘酚酯酶呈阴性,而用它与 POX 双重染色则呈阳性。所以认为双重染
色的化学方法,无论是结果的可靠性,还是对细胞的分辨程度都较单一染色更敏
感、更特异。目前双染的方法很多。
细胞化学染色是白血病诊断、分型和鉴别诊断中不可缺少的客观指标。它
们单独或联合应用可以使大多数白血病患者得以明确诊断与分型。使确诊率大大
提高。若仅用形态学来观察,确诊率仅为 40% ~ 50%,而加用细胞化学染色可
以将确诊率提高到 80% 以上。可见细胞化学在实验诊断上的重要意义。尽管这样,
仍有少数白血病还是不能确定其类型,此时需要结合其他的检查,如免疫学(单
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