Page 167 - 质量检测与计量检测技术研究

第四章 食品检验检测技术 ■

2. 多重 PCR 检测方法
多重 PCR 检测技术是以常规 PCR 检测方法为基础进行改进与优化所得。常
规 PCR 检测方法从本质上来说是基于单引物的检测，而多重 PCR 检测技术则实
现了对多个 DNA 引物的检测。对于相同的 PCR 反应体系，通过投加 ≥2 个反应

引物的方式，受聚合酶影响产生扩增与复制。需要注意的是，本方法用于微生物
检测时，反应前投加 2 个或 2 个以上 DNA 引物，因而在聚合酶作用下能够生成
多个相对应的 DNA 反应片段，在应用于食品微生物检测中时，能够就微生物的
致病因子展开系统分析，这对于微生物检测结果准确率的提升是非常关键的。且

本方法实施过程中所分析致病因子明显较传统方法更多，检测效率较高。目前，
多重 PCR 检测技术能够缩短检测时间、减少检测内容遗漏风险，促进检测结果
准确率的提升，且对样本投入量有一定的控制效果，可通过多基因检测的方式获
得较高的经济效益。

3. 定量 PCR 检测方法
定量 PCR 检测技术是在常规 PCR 检测方法的基础上变形得到，操作原理及
步骤上与传统 PCR 方法存在一定差异，但将其应用于食品微生物检测中时能够
表现出突出的优势。应用本方法检测食品样本中微生物的基本原理是对细胞组织

中总 DNA 进行提取，将 mRNA 作为检测模板，选择随机引物并通过逆转录酶反
应的方式转录形成 cDNA。在此基础上，形成 cDNA 模板并对其进行扩增处理，
以此种方式获得检测基因及其表达。相较于传统的 PCR 检测技术，定量 PCR 检
测技术尝试将待检测食品样本目标中的一条 RNA 先进行逆转录处理，得到互补

DNA，使后续的扩增以及复制处理具有针对性。为确保检测结果的可靠性，在
本检测方法实施期间必须注意确保参与逆转录反应的 DNA 模板的完整性，且剔
除其他蛋白质或杂质的影响，保障基因链的完整性。本检测方法可以尝试与数字
技术以及荧光技术相结合，提高检测过程的灵敏度，以便获取更高精准度的检测

结果。
（三）PCR 技术在食品微生物检测中的应用
近年来，PCR 技术已经在食品微生物检测领域得到广泛应用，在食品致病菌、
乳酸菌以及水源细菌的检测等环节中发挥出了一定的优势。

1. 食品致病菌检测
以往针对食品致病菌展开的检测手段存在一系列问题，检测过程耗时长且操

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