Page 166 - 质量检测与计量检测技术研究

Research on Quality Testing and Measurement Detection Technology
质量检测与计量检测技术研究

具体操作中，检测人员需要对靶序列初始浓度进行准确记录，根据参与反应荧光
浓度的实测值得到准确的检测结论。相关报道中指出，PCR 荧光定量技术能够准
确反映出待测食品样品中所含微生物，同时掌握基因标记与基因复制的相关内容。
这样一来，即便食品样品中所含微生物数量有限，仍然可以通过对初始浓度进行

标记与记录的方式获取可靠的检测结果。且相较于其他检测技术，基于荧光定量
的 PCR 技术在具体实施中有较高的自动化水平，检测结果准确性高，整个操作
过程简单可控，对中国当前的食品环境市场而言有较高的适用性。
（二）基于 PCR 技术的食品微生物检测方法

PCR 技术在食品微生物检测领域中的应用相当普遍，PCR 技术的合理应用
为金黄色葡萄球菌、大肠杆菌以及绿脓杆菌等食品领域常见微生物检测提供了可
能性。以金黄色葡萄球菌为例，该菌种在新鲜蔬果中的繁殖速度非常快，尤其是
对于存放有一定时间的蔬果，表面金黄色葡萄球菌的繁殖速度极快，其代谢产物

肠毒素会对人体产生非常大的影响，甚至可能导致食物中毒事件的发生。因此，
在食品微生物检测中必须高度重视对该指标的检测，科学确定该菌种以及类似菌
种的分布情况，最大限度排除其对人体安全所产生的不利影响。而在这一背景下，
PCR 技术能够实现对被测食品样品中微生物的可靠检测，保障检测精度符合要

求。食品生产企业可以尝试将基于 PCR 技术的微生物检测引入产品出厂检验环
节，避免不合格食品流入市场。所涉及的微生物检测方法有以下几种类型。
1. 普通 PCR 检测方法
普通 PCR 检测法是食品微生物检测中应用最为广泛的检测方案。检测期间，

将一定比例聚合酶添加至混合物中，可形成检测所需的基础样本。后续检测期间，
还应当对反应条件以及环境温度进行预设，并展开针对基础样本的处理反应。在
温度可控的条件下，混合物由于添加有一定比例的聚合酶，容易导致目标物质产
生扩增反应。基础样本检测期间高温变性是指在加热条件下，经过一段时间模板

DNA 解离成为易与引物结合的单链；低温退火为 DNA 片段成单链后降温，引物
与模板 DNA 单链的互补序列配对结合；延伸为 DNA 模板—引物结合物在经聚
合酶的作用，按碱基互补配对与半保留复制原理，复制 DNA。上述 3 个过程可
不断重复，得到更多的半保留复制链，为下次复制过程提供模板。上述循环过程

反应迅速，2~3h 可得到几百万条 DNA，以满足食品检测需求。

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