Page 149 - 食品检验检测技术与质量安全管理研究
P. 149
第六章 食品工程中的质量安全检验技术应用
第六章 食品工程中的质量安全检验技术应用
第一节 基因工程抗体在食品安全检测中的进展
食品安全与人类健康有直接关系，近年来因食用受到严重污染的食品而造成
中毒的事件屡有发生，使人们对食品安全问题越来越重视。建立快速、简便、灵
敏的食品污染物检测方法一直是每个国家的追求，抗体免疫分析法具有以上优点。
一般不需要贵重仪器，可大大简化样品前处理过程，易普及和推广，因此以其独
特的优势在食品安全检测中占有重要地位。
基因工程抗体称为第三代抗体，应用 DNA 重组技术及蛋白质工程技术将抗
体基因进行加工、改造和重新装配，然后克隆到合适的表达载体中，在适当的宿
主细胞（如大肠杆菌、酵母细胞、植物细胞、昆虫细胞及哺乳动物细胞等）中表
达并正确折叠成具有生物学功能的一种抗体分子。有学者首次在骨髓瘤细胞中成
功地表达了人鼠嵌合抗体，拉开了基因工程抗体技术的序幕。由于基因工程抗体
具有分子小、免疫原性低、可塑性强及不需免疫动物可大批生产等优点。在食品
安全检测方面显示出前两代抗体无法比拟的优点。利用基因工程抗体检测食品中
污染物具有广阔的发展空间。
一、基因工程抗体检测食品中污染物原理
ELISA 检测技术是将抗原抗体反应的高度特异性和酶的高效催化作用相结合
发展建立的一种免疫分析方法。其基本原理是将受检样品和酶标抗原或抗体按一
定程序与结合在固相抗原或抗体起反应形成复合物，固相载体上酶标抗原或抗体
被结合量（免疫复合物）即与标本中待检抗体或抗原的量成一定比例，在一定底
物参与下，复合物上的酶催化底物使其水解、氧化或还原成另一种带色物质。由
于酶的降解底物与显色是成正比的，通过肉眼观察或分光光度计测定，从而确定
是否存在未知抗原或含量。
基因工程抗体将分离的可变区 VH 和 VL 基因分别进行扩增，扩增后的 VH
和 VL 通过 linker 连接构成 scFv，重组入原核细胞或真核细胞中进行高效表达，
获得特异性的抗体。或建立噬菌体库通过淘洗获得特异性抗体。将特异性的抗体
139
