Page 152 - 食品检验检测技术与质量安全管理研究
P. 152
食品检验检测技术与质量安全管理研究
反应率,甚至提高与抗原结合的特异性等,改造后的抗体特性更适合在临床和食
品安全检测中应用。
四、基因工程抗体在食品安全检测中应用
基因工程抗体技术经过了 20 多年的发展,取得了巨大的成就,但是在应用
中仍然存在一些问题,如亲和力较低、稳定性较差、半衰期短等,这些成为它在
食品安全检测应用中的一个制约瓶颈,近年来国内外许多科研机构从事食品基因
工程抗体免疫检测技术的研究,取得了一定的成就。
(一)检测食品中的毒素
食品中天然存在的毒素、适合条件下产生的次生代谢毒素以及在加工过程产
生的毒素(如动物肝脏毒素,河豚毒素、真菌毒素、亚硝基胺)等都会对引起人
中毒,严重危害人体健康,毒素的快速检测方法是阻止其对人体伤害的最有效方
法。某学者首次从抗玉米赤霉烯酮(ZEN)的杂交瘤细胞株 2G3-6E3-2E2 提取
RNA,成功的扩增可变出 VH(340bp)和 VL(320bp)基因。通过噬菌体展示
技术,成功制备出抗玉米赤霉烯酮 scFvQY1.5。利用 scFvQY1.5 建立间接 ELISA
技术检测玉米赤霉烯酮,线性范围为 10 ~325ng/mL,检测下限(LOD)为 10ng/
mL。有学者制备出肠毒素 A 重组基因工程抗体蛋白 SEA 并建立间接 ELISA 检
测肠毒素 A,线性范围为 1~ 62.5ng/mL,检测下限为 1ng/mL。也有学者成功利
用噬菌体展示技术制备出抗黄曲霉毒素 B1ScFv。从小鼠的脾细胞提取 RNA,扩
增获得 VH 和 VL,用小肽 Linker 连接获得 VH-Linker-VL,再克隆入噬菌粒表达
载体 PCANTAB5E 中,构建单链抗体 scFv 文库,经过吸附 – 洗脱 – 富集,筛选
抗黄曲霉毒素 B1scFv。用 ELISA 方法检测了当地市场上的 4 份花生样本,检测
结果有 3 份超过了国家的食品安全标准。基因工程抗体应用与毒素检测目前与仪
器法相比还有很多的局限性,笔者认为以上研究者之所以成功采用了一些新技术
和方法改进了基因工程抗体的特性,有研究采用电转法转化代替传统的化转法来
扩大抗体库的容量、多样性和质量,为保证后期淘选出特异性抗体打下坚实的基
础,还有研究通过复性技术将表达过程中变性的抗体复性;利用镍螯合层析与谷
胱甘肽亲和层析方法进行抗体纯化,保证了抗体的正确折叠。
(二)检测食品中农药残留
近年来滥用农药现象使农药残留量超标相当严重,并逐年加剧。食品中农药
残留主要包括农药中的有机磷类、拟除虫菊酯类、有机氯类、三嗪类、氨基甲酸
142

