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食品检验检测技术与质量安全管理研究
反应率明显优于传统单克隆抗体。随后又对重组抗体进行改造,应用获得的重组
抗体建立了能对 18 种磺胺类药物进行多残留检测的荧光免疫分析方法。这部分
认为首先兽药和农药一样都是小分子物质,基因工程抗体的好坏首先取决于细胞,
上述研究者的细胞来源好。某学者采用电转代替化转来扩大抗体库的容量和质量,
也有学者通过分泌型表达使目的蛋白分泌到周质空间。再通过超声波破碎菌体使
周质空间蛋白溢出保证了抗体的活性,除此之外在 ELISA 检测时将传统的酶发
色改成发光,增加了检测兽药的灵敏度。某研究者将重组后的抗体进行人为的区
域结构改造,增加了抗体的特异性结合能力。
(四)检测食品中重金属污染
有毒有害元素包括砷、铬、镉、汞、铅、铜、铝等重金属,广泛存在于茶叶、
粮食、面制食品、蔬菜、植物油、水果、调味品、畜禽肉、乳品、蛋类、水产品
等食品中,具有潜在危害性。近年来出现利用基因工程抗体检测金属元素的报道,
有学者在杂交瘤细胞株 DF4 中提取总 RNA,合成第一链 cDNA,cDNA 扩增分
别获得可变区基因(VH 和 VL),然后用重叠延伸法直接将轻、重链可变区基
因组装在一起,构成单链抗体基因 scFv,scFv 与 PMD19-T 载体连接,构建成克
隆载体,转化 E.coliDH5α 感受态细胞,经诱导表达获得 scFv 融合蛋白,建立
相应的 ELISA 检测方法。
获得的抗体 DF4 检测铜的 ICs 为 0.61ug/mL,最低检测限是 0.014ug/mL。低
于中国饮用水对铜最低残留 1ug/mL。
五、基因工程抗体用于食品安全检测中不足与展望
尽管基因工程抗体技术取得一些成就,基因工程抗体应用在食品安全检测上
还处于初级阶段和完善过程中,还存在许多问题:一是如何克服抗体基因在 PCR
扩增中的扩增偏差;二是表达抗体过程中的密码子偏差;三是基因工程抗体亲和
力低,亲和力比其亲本单克隆抗体低 10~1000 倍;四是基因工程抗体稳定性差,
常常显示聚集倾向;五是基因工程抗体分子质量小,清除速度快,有时候达不到
检测的时间;六是假阳性。这些都成为它在食品安全检测应用中的制约因素。
目前改善基因工程抗体性能的研究的热点主要有:
一是提高库容量和多样性技术,包括发展和完善展示技术;选择适当的限制
性内切酶酶切位点;选择可变区基因内没有或者很少见到的酶切位点;增加细菌
的转化效率;采用轻链、重链细胞内随机组合法增加噬菌体的包装效率等;二是
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