Page 408 - 新编动物防疫检疫手册

2 检测方法与判定
2.1 方法：将上述组织制成冰冻切片，或待检的细胞培养片（见附件 1），将

液体吸干后经冷丙酮固定 5 ～ 10 分钟，晾干。滴加猪瘟荧光抗体覆盖于切片或细

胞片表面，置湿盒中 37℃作用 30 分钟。然后用 PBS 液洗涤，自然干燥。用碳酸
缓冲甘油（pH9.0 ～ 9.5，0.5 M）封片，置荧光显微镜下观察。必要时设立抑制试

验染色片，以鉴定荧光的特异性。

2.2 判定：在荧光显微镜下，见切片或细胞培养物（细胞盖片）中有胞浆荧光，

并由抑制试验证明为特异的荧光，判猪瘟阳性；无荧光判为阴性。

2.3 荧光抑制试验：将两组猪瘟病毒感染猪的扁桃体冰冻切片，分别滴加猪
瘟高免血清和健康猪血清（猪瘟中和抗体阴性），在湿盒中 37℃作用 30 分钟，

用生理盐水或 PBS（pH7.2）漂洗 2 次，然后进行荧光抗体染色。经用猪瘟高免血

清处理的扁桃体切片，隐窝上皮细胞不应出现荧光，或荧光显著减弱；而用阴性
血清处理的切片，隐窝上皮细胞仍出现明亮的黄绿色荧光。

附件 3

兔体交互免疫试验

本方法用于检测疑似猪瘟病料中的猪瘟病毒。
1 试验动物

家兔 1.5 ～ 2kg、体温波动不大的大耳白兔，并在试验前 1 天测基础体温。

2 试验操作方法

将病猪的淋巴结和脾脏，磨碎后用生理盐水作 1：10 稀释，对 3 只健康家兔
作肌肉注射，5mL/ 只，另设 3 只不注射病料的对照兔，间隔 5 天对所有家兔静脉

注射 1：20 的猪瘟兔化病毒（淋巴脾脏毒），1mL/ 只，24h 后，每隔 6 小时测体

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